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Ku70在慢性粒细胞白血病细胞中表达的研究的开题报告

一、研究背景

慢性粒细胞白血病（chronicmyeloidleukemia，简称CML）是一种由于骨髓中干细胞的异常增生而引起的癌症。该疾病的发病率逐年上升，已在全球范围内成为一种较为常见的恶性肿瘤。目前，治疗CML的主要手段为酪氨酸激酶抑制剂（tyrosinekinaseinhibitors，简称TKIs），但是很多患者存在耐药问题。因此，寻找新的治疗靶点是治疗CML的重要策略之一。

Ku70是一种DNA修复蛋白，主要参与非同源末端连接（non-homologousendjoining，简称NHEJ）DNA修复机制。最近的研究表明，Ku70在某些癌症的发生和发展中扮演重要的角色。然而，目前对Ku70在CML中的机制仍不十分清楚。

二、研究目的

本文旨在探究Ku70在CML中的表达及其调控机制。具体研究目的包括：

1.检测CML细胞中Ku70的表达水平。

2.探究Ku70在CML细胞中的生物功能。

3.分析Ku70调控CML细胞增殖和凋亡的分子机制。

三、研究方法

1.细胞培养：选取CML细胞系K562，以及正常造血细胞系HSC-3、KG-1A作为对照。使用RPMI1640培养基中添加10%FBS培养以上三种细胞系。将差不多密度的CML细胞接种于含有相同浓度TKI的培养基中，培养72h，用MTT法检测不同的酪氨酸激酶抑制剂对CML细胞的作用。

2.免疫印迹：通过Westernblot检测CML细胞中Ku70的表达水平及调控其下游信号分子的表达，如Akt、Caspase-3等。

3.流式细胞术：登记CML细胞的周期和凋亡情况。

4.克隆形成实验：将CML细胞接种在含有不同浓度TKI的培养基中并培养2周，收集并计数克隆形成的细胞。

四、研究预期结果

1.CML细胞中Ku70的表达水平会明显高于正常造血细胞系。

2.下调Ku70表达可以抑制CML细胞的增殖和促进其凋亡。

3.Ku70参与CML细胞的增殖和凋亡过程可能是通过调控Akt和Caspase-3的表达水平实现的。

五、研究意义

本研究可以进一步探究CML的病因和发展机制，同时为开发治疗CML的新靶点提供基础理论和实验证据。