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脑源性神经营养因子基因转染大鼠骨髓基质细胞的实验研究的开题报告

【题目】

脑源性神经营养因子基因转染大鼠骨髓基质细胞的实验研究

【研究背景】

脑源性神经营养因子（BDNF）是一种神经营养因子，广泛存在于人体神经组织中，对中枢神经系统的形成、生长和发展具有重要的调节作用。BDNF通过特异的受体TrkB使神经细胞的生长锁定在突触附近，促进神经细胞的生长和成熟，并维持突触的稳定性和塑性。然而，一些疾病如神经退行性疾病、创伤性脑损伤、药物滥用等都会导致BDNF表达降低，从而影响神经细胞的生长和发育。

骨髓基质细胞是具有多能性的间充质干细胞，可以分化为多种成分，包括骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等。近年来的研究表明，骨髓基质细胞可以通过隧道系统长距离传导BDNF，从而对神经系统具有重要的影响。因此，将BDNF基因转染到骨髓细胞中，可能有望提高神经细胞的生长活力和恢复受损神经组织的功能。

【研究目的】

本研究旨在探究BDNF基因转染大鼠骨髓基质细胞后，其对神经系统的影响，为神经退行性疾病的治疗和神经损伤的修复提供新的治疗思路。

【研究方法】

1.提取大鼠骨髓基质细胞，2010年的CGMP标准生产。

2.在BDNF基因载体的帮助下，运用真核基因转染方法将BDNF基因转染到大鼠骨髓基质细胞中。

3.利用Westernblotting及免疫荧光染色分析BDNF表达情况。

4.通过实时荧光定量PCR（qPCR）使用Aminogenin和RPL13a作为参考基因来检测BDNF在转染细胞中的表达情况。

5.运用流式细胞术和仪器检测骨髓基质细胞向神经细胞分化的情况。

6.建立模拟神经系统的体外模型，观察转染细胞对神经系统的影响。

【预期结果】

通过以上实验手段，预期结果为成功将BDNF基因转染到大鼠骨髓基质细胞中，并使其表达。同时，预期结果应该包括转染细胞对神经系统的影响，包括神经细胞的生长和成熟，突触的稳定性和塑性等。最终，本研究提供的成果可能为神经退行性疾病和神经损伤的治疗提供新的治疗思路。