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实验三革兰氏染色法

一、实验目的学会细菌制片方法；掌握革兰氏染色方法及结果判断。

二、实验原理革兰染色法是由丹麦医生ChristianGram于1884年创立的一种细菌鉴别染色法，根据染色结果将细菌分成两大类，即革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-），此有助于细菌鉴别、分析细菌的结构特点、致病性和选用抗菌药物提供依据。

二、实验原理结晶紫初染碘液媒染乙醇脱色番红复染涂片固定

二、实验原理

二、实验原理革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌

二、实验原理革兰氏染色的机理机理：与细胞壁厚薄、肽聚糖和类脂含量有关G+菌：细胞壁厚，肽聚糖含量高，交联度大，当乙醇脱色时，肽聚糖因脱水而孔径缩小，导致结晶紫-碘复合物被阻留在细胞内，细胞不能被酒精脱色，番红复染后仍呈紫色。Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，而且含脂量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，酒精将细胞脱色，番红复染后呈红色。

三、实验器材及试剂枯草芽孢杆菌、大肠杆菌18～24h培养物革兰染色液一套（草酸铵结晶紫染液、卢戈碘液、95%乙醇、番红染液）酒精灯，玻片，接种环，吸水纸，香柏油，二甲苯，显微镜。

四、实验步骤1.涂片2.干燥3.固定4.染色水洗、吸干5.镜检

四、实验步骤1、涂片取洁净载玻片1片，将1滴纯水置于玻片上，接种环灭菌后取菌少许