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重组大肠杆菌DH5α生产rNGR-Tum-5工艺的研究的任务书
任务名称:重组大肠杆菌DH5α生产rNGR-Tum-5工艺的研究
任务描述:
rNGR-Tum-5是一种有望用于肿瘤靶向治疗的融合蛋白药物。为了实现该药物的工业化生产,本任务将研究重组大肠杆菌DH5α生产rNGR-Tum-5的工艺。
具体任务如下:
1.确定rNGR-Tum-5基因序列并进行合成。
2.构建基于pUC19质粒的rNGR-Tum-5表达载体,包括启动子、多聚A尾和抗生素抗性基因。
3.构建基于pET28a质粒的重组大肠杆菌表达载体,包括启动子和抗生素抗性基因。
4.将rNGR-Tum-5表达载体和大肠杆菌表达载体转化至大肠杆菌DH5α中,筛选出具有rNGR-Tum-5表达能力的菌株。
5.优化rNGR-Tum-5的表达条件,包括培养基配方、表达温度、诱导时间和诱导剂浓度等。
6.纯化rNGR-Tum-5蛋白,评估其纯度和生物活性。
7.分析rNGR-Tum-5对肿瘤细胞的靶向性和细胞毒性。
任务完成标准:
1.成功合成rNGR-Tum-5基因序列,并构建出基于pUC19和pET28a质粒的表达载体。
2.成功转化rNGR-Tum-5表达载体和大肠杆菌表达载体至DH5α中,并获得能够表达rNGR-Tum-5蛋白的菌株。
3.优化rNGR-Tum-5的表达条件并成功纯化出rNGR-Tum-5蛋白。
4.评估rNGR-Tum-5的纯度和生物活性,并分析其对肿瘤细胞的靶向性和细胞毒性。
5.撰写项目报告,包括实验方法、结果、讨论和结论,并发表相关文章。
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