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RNA连接酶的纯化表达

摘要：RNA连接酶可以连接2,3-环磷酸酯和5-羟基末端，在tRNA的成熟以及mRNA的剪切中发挥着重要的作用。RNA连接酶通过依赖GTP的方式形成磷酸二酯键，作为RNA分子的有效连接工具，在分子生物学实验中发挥了重要的作用，它对动物胚胎的发育和抗体分泌具有重要的调节作用，并且与多种神经疾病发生密切相关。为了进一步研究，我们根据亲和层析的原理进行蛋白的纯化，其原理就是通过将具有亲和力的两个分子中一个固定在不溶性基质上，利用分子间亲和力的特异性和可逆性，对另一个分子进行分离纯化对RNA连接酶进行纯化。我们通过改变IPTG诱导浓度及诱导时间，找到了蛋白表达的最优条件