KGF噬菌体活性肽构建及防治放射性口炎的实验研究的开题报告.docxVIP

KGF噬菌体活性肽构建及防治放射性口炎的实验研究的开题报告

题目：KGF噬菌体活性肽构建及防治放射性口炎的实验研究

研究背景及意义：

放射治疗是目前临床中治疗癌症的重要方法之一，但同时也带来了一系列不良反应，其中放射性口炎是较为常见的一种放射反应，主要表现为口腔黏膜红肿、疼痛、溃疡等症状，病情轻重不一。目前治疗放射性口炎的方法较为局限，主要包括口腔清洁、口腔护理和给予治疗性营养等。因此，开发一种有效的治疗放射性口炎的方法具有重要意义。

KGF（keratinocytegrowthfactor）是一种由成纤维细胞分泌的成纤维细胞生长因子，能够刺激上皮细胞生长和修复损伤。近年来的研究表明，KGF噬菌体活性肽具有与原KGF类似的生物活性，能够促进上皮细胞增殖和恢复，有望成为治疗放射性口炎的新方法。

因此，本研究将构建KGF噬菌体活性肽，并进行实验研究，探讨其对放射性口炎的治疗效果，为治疗放射性口炎提供新的治疗思路和方法。

研究内容：

1.利用PCR技术从人类KGF基因中克隆KGF噬菌体活性肽基因，构建KGF噬菌体活性肽表达质粒。

2.将表达质粒转化至大肠杆菌中进行表达，利用纯化手段获得纯化的KGF噬菌体活性肽。

3.构建不同浓度的KGF噬菌体活性肽溶液，对放射性口炎小鼠模型进行治疗，并评估治疗效果。

4.利用免疫组化、免疫印迹等技术，探究KGF噬菌体活性肽在放射性口炎治疗中的作用机制。

研究方法：

1.克隆KGF噬菌体活性肽基因。从人类KGF基因中设计特异性引物，通过PCR技术进行扩增。

2.构建KGF噬菌体活性肽表达质粒。将扩增得到的KGF噬菌体活性肽基因与表达质粒进行重组，构建KGF噬菌体活性肽表达质粒。

3.表达和纯化KGF噬菌体活性肽。将KGF噬菌体活性肽表达质粒转化至大肠杆菌中进行表达，并利用柱层析等纯化手段获得纯化的KGF噬菌体活性肽。

4.建立放射性口炎小鼠模型。将小鼠分为对照组、模型组和不同剂量KGF噬菌体活性肽组，用60Co放射线照射小鼠口腔黏膜建立放射性口炎模型。

5.治疗实验和评估。对不同剂量KGF噬菌体活性肽组进行不同浓度的KGF噬菌体活性肽溶液治疗，并观察治疗效果。

6.探究作用机制。使用免疫组化、免疫印迹等技术，探究KGF噬菌体活性肽对上皮细胞增殖和修复的作用机制。

预期成果：

1.克隆KGF噬菌体活性肽基因，构建KGF噬菌体活性肽表达质粒。

2.利用纯化手段获得纯化的KGF噬菌体活性肽。

3.探究KGF噬菌体活性肽对放射性口炎的治疗效果和作用机制。

4.为治疗放射性口炎提供新的治疗思路和方法。

参考文献：

1.KuoM.Y.,SavarajN.,IshikawaT.etal.Enhancedgeneexpressionofkeratinocytegrowthfactorinhumanpapillomavirus-immortalizedcervicalcelllinesanditsrestorationfollowingretinoicacid-induceddifferentiation.Oncogene,1997.

2.RatanatharathornV.,NashM.A.,PrasadU.etal.Useofkeratinocytegrowthfactorinthepreventionoforalmucositisinducedbychemotherapyorradiotherapy.AnnOncol,2003.