临床微生物学检验(理论)细菌部分 重点整理(下篇)——医学检验资料文档.pdfVIP

分枝杆菌属

是一类细长、略带弯曲、呈分枝状生长的细菌，革兰染色阳性，无芽胞、无荚膜。抗酸染色

阳性，故又称抗酸杆菌。营养要求较高，常用罗琴培养基，生长缓慢，2~8周后方可见菌落

第一节结核分枝杆菌

是结核病的病原体。结核病在上世纪40、50年代发病率和死亡率很高，60~80年代经过人

们的努力，大大降低，80年代后期，发病率又有所上升，主要是因为耐药性的出现。

一、临床意义

本菌抵抗力强，可存活6~8月，随着漂浮于空气中的微滴核被吸入呼吸道，植入肺泡发育繁

殖导致结核。引起结核病，随社区人群生活状况不同发病率有所差异，全球约有1/3人感染，

有人类死亡之首和白色瘟疫之称。

二、生物学性状

1、形态染色：

①细长、略弯曲杆菌，牛型结核分枝杆菌稍短。排列成团、成堆

②抗酸染色阳性，治疗后菌体呈非抗酸性G+颗粒，称much颗粒（L型变异）

③金胺“O”染色菌体：呈黄色荧光

2、培养特性

最适温度35~37℃，最适pH6.4~6.8。专性需氧，在液体培养基上形成菌膜，有毒株呈索状

生长

营养要求高，专性需氧，专嗜甘油为碳源，常用罗琴培养基(鸡蛋、甘油、枸橼酸钠、天门

冬酸、马铃薯粉、孔雀绿、钾镁离子)，繁殖慢，增殖一代需要18小时，在固体培养基上2～

5周才出现肉眼可见的菌落，为菜花样，凸起、不透明、粗糙，牛型结核分枝杆菌为光滑型。

3、生化反应：

烟酸试验(+)，硝酸盐还原(+)，中性红(+)，烟酰胺酶试验(+)，脲酶试验(+)，牛型分枝杆

菌均为阴性。糖类发酵(-)，热触酶(-)，Tween水解(-)；

热触酶(-)热磷酸酶(-)，为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌鉴定试验，后者阳性

4、抵抗力：强

温度：菌悬液80℃5min、痰标本煮沸5min完全杀死细菌

光线：对紫外线敏感

干燥：对干燥或干热抵抗力强，干燥痰中可存活数周

化学因素：75%乙醇5min，石炭酸、来苏儿、甲醛敏感

5、结核杆菌多种性状可发生变异如：菌落变异、毒力变异等。菌落变异由粗糙型变成光滑

型。

毒力变异→卡介苗（BCG）：1921年两位科学家将有毒的牛型分枝杆菌接种在含甘油、

胆汁、马铃薯的培养基中，经21年230代传代获得的减毒菌株，即卡介苗，沿用至今。

三、免疫性与致病性

1、免疫性：有菌免疫或称传染性免疫，细胞免疫在抗感染免疫中起重要作用。

本菌可经血、淋巴，在骨、关节、肾、脑膜等处引起相应的结核病

2、致病物质：

荚膜：抗吞噬/细胞壁脂质/磷脂：单核细胞增生，结核结节形成，干酪样坏死/分枝菌

酸：抗酸性/索状因子：破坏线粒体膜/蜡质D：IV型变态反应/硫酸脑苷脂：抑制吞

噬细胞/蛋白质

3、致病机制：Ⅳ型超敏反应

结核结节的形成：是单核细胞参与的炎性肉芽肿反应，是细胞免疫和IV型变态反应平衡的

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结果。细菌的脂质抵抗吞噬，巨噬细胞被破坏，形成原发感染。3~6周后，细胞变形，IV

型变态反应产生，磷脂刺激巨噬细胞转化为上皮样细胞融合成多核巨细胞。抑制蛋白酶对组

织溶解，产生干酪样坏死。

4、Koch现象（郭霍现象）和IV型变态反应：

有毒结核分枝杆菌被初次接种豚鼠10－14天，局部产生小节，形成肿块→坏死溃疡侵入附

近淋巴结→淋巴血流全身播散，经久不愈→动物死亡。说明初次感染，机体无免疫力和超敏

反应

在8~12周之前先动物接种减毒小量结核分枝杆菌，再次接种结核分枝杆菌后局部反应提早

出现，2~3天内红肿硬结溃疡痊愈。说明再次感染，机体有免疫力和超敏反应

三、微生物学检查

1、标本采集：根据病变部位不同而定(晨痰、支气管洗液、清晨的中后段尿)。运送:消毒容

器

2、直接检查：萋-尼抗酸染色(热)、Kinyoum染色(冷)，金-胺0染色

痰涂片要厚，齐-尼抗酸染色后，观察至少100个视野，结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色，

其他细菌和细胞为蓝色。结果应报告“找到或未找到抗酸性杆菌”，而不能报告“找到结核

分枝杆菌”。

3、消化：4%NaOH37℃15~30分钟；胰酶-新洁尔灭法；4%硫酸法（尿标本）

4、培养分离、生化反应：烟酸、硝酸盐还原、触酶

标本接种于选择性固体培养基中，常用罗琴培养基，所含的孔雀绿或青霉素可抑制杂菌生长

37℃，5％~10％CO2培养8周，如果出现干燥呈颗粒状、灰白色菌落，涂片染色为抗酸阳

性，多数是结核杆菌