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OGG1与MTH1基因在KBrO3诱导小鼠DNA氧化损伤中作用的研究的开题报告
一、研究背景和意义
氧化损伤是人体健康的重要危害因素之一，环境污染和生活方式等都会使人体受到氧化损伤影响。DNA是生物体内最基本的遗传物质，它的稳定性和完整性对生命的维持至关重要，而DNA氧化损伤则会引起错配、断裂、缩短等导致疾病的合成。因此，研究DNA氧化损伤的诱导机制，及保护维护DNA完整性的修复方式，对于人类癌症、中风、神经退行性疾病等疾病的预防和治疗有重要意义。
OGG1和MTH1基因是DNA修复基因中的两种，在DNA氧化损伤修复过程中发挥着重要作用。OGG1主要参与抗氧化反应，它能修复DNA中的氧化损伤碱基，维持基因的正常转录和翻译。MTH1则是细胞内抗氧化酶，能够清除DNA中的氧化应激（主要为8-氧鸟嘌呤核苷酸），以保持细胞的正常代谢和生存。因此，研究OGG1和MTH1基因在DNA氧化损伤修复过程中对氧化应激反应的调节机制，对于预防DNA氧化损伤引起的疾病，提升人体免疫力等具有重要意义。
KBrO3是一种常见的化学物质，它能够诱导DNA氧化损伤，并引起细胞的毒性和突变，因此，在本研究中使用KBrO3作为外部诱导因素，探究OGG1和MTH1基因在氧化损伤修复过程中的作用及机制。
二、研究内容和方法
研究目标：探究OGG1和MTH1基因在KBrO3诱导小鼠DNA氧化损伤中作用的机制。
研究内容：
1.KBrO3诱导小鼠DNA氧化损伤的建立：建立KBrO3诱导DNA氧化损伤小鼠模型，利用8-氧鸟嘌呤、DNA单链断裂等指标检测氧化损伤的程度。
2.OGG1和MTH1基因表达变化：检测OGG1和MTH1基因在不同时间段下其表达变化，并采用Westernblot方法检测其蛋白水平的变化。
3.DNA损伤修复酶活性测定：检测OGG1和MTH1基因在修复DNA氧化损伤过程中的修复剂活性，并采用荧光探针法测定氧化应激水平的变化。
4.细胞凋亡检测：采用细胞凋亡荧光探针法检测细胞凋亡率的变化。
研究方法：
1.建立KBrO3诱导小鼠DNA氧化损伤的模型：将小鼠分为实验组和对照组，实验组小鼠给予KBrO3诱导，对照组小鼠给予正常生理盐水，利用实时荧光定量PCR、ELISA、Westernblot等方法检测氧化损伤程度。
2.OGOG1和MTH1基因表达变化检测：采用RT-qPCR、Westernblot等方法检测OGG1和MTH1的mRNA水平及蛋白水平的变化。
3.DNA损伤修复酶活性测定：采用活性相关试剂盒检测OGG1和MTH1的修复酶活性。
4.细胞凋亡检测：采用DNA染色体凝胶电泳、DNALadder、AnnexinV-FITC/PI双染法等方法检测细胞凋亡率。
三、研究意义
1.本研究将有助于进一步探究OGG1和MTH1基因在DNA氧化损伤修复过程中的作用机制。
2.结果将为防治因DNA氧化损伤导致的疾病与诱导DNA损伤抗性提供新的治疗思路。
3.同时，这项研究将可能从分子水平加深对DNA作为生物学过程的理解，在遗传性和环境效应方面对人类健康状况作出更深入的解释。
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