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鸡传染性支气管炎病毒(793/B)M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定的开题报告

题目：鸡传染性支气管炎病毒(793/B)M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定

背景：

鸡传染性支气管炎病毒(infectiousbronchitisvirus,IBV)是一种严重危害畜牧业的病毒，属于冠状病毒科(Coronaviridae)，病毒粒子为球形，直径60-220nm,病毒基因组为ssRNA，全长为27-32kb，在病毒基因组中，M基因编码的蛋白是负责病毒囊壳组装的重要蛋白，也是诱导机体免疫应答的重要抗原。根据之前的研究，不同IBV菌株的M基因序列差异很大。

研究目的：

本研究旨在克隆鸡传染性支气管炎病毒(793/B)的M基因和截短M基因，并进行原核表达和鉴定，为他后续研究提供基础数据。

研究内容：

1.采用RT-PCR技术，从鸡传染性支气管炎病毒(793/B)的RNA中扩增出M基因以及截短M基因序列。

2.将扩增后的M基因和截短M基因序列克隆至表达载体pET-28a(+)中，然后将表达载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行原核表达。

3.蛋白的表达进行SDS凝胶电泳分析，并利用Westernblot检测蛋白的免疫反应性，检测克隆出来的蛋白。

4.纯化得到的蛋白进行质谱分析和生物学活性鉴定，了解M基因和截短M基因蛋白的结构和功能特性。

研究意义：

通过克隆IBV的M基因和截短M基因并进行原核表达和鉴定，可以为后续的病毒结构和功能研究提供数据支持。同时，对于克隆和表达其它病毒蛋白也能提供参考和借鉴价值。