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CREG对人动脉内皮细胞单层通透性的影响及调控机制的研究的开题报告

一、研究背景和意义

动脉粥样硬化是一种常见的、进展性的、具有多因素性的慢性疾病，其发病和发展涉及多种因素，其中包括内皮细胞单层通透性的改变。内皮细胞单层通透性的改变会导致血管内膜透明度降低，肿物细胞和各种蛋白质进入血管内膜，加重血管炎症反应，使粥样斑块侵袭内膜和发展成为缺血性心血管疾病的主要原因之一。因此，研究内皮细胞单层通透性的调控机制对于预防和治疗动脉粥样硬化等心血管疾病具有重要的意义。

CREG（CellularRepressorofE1A-stimulatedGenes）是一种新颖的多功能蛋白，参与细胞增殖和分化、凋亡调控、细胞核质转移和稳态等多种生物学过程。在很多种细胞中都有表达，包括心血管系统中的内皮细胞。CREG在调控内皮细胞单层通透性方面的作用还没有被充分探讨，因此本研究将分析CREG对内皮细胞单层通透性的影响及其调控机制。

二、研究目标和内容

本研究旨在探究CREG对人动脉内皮细胞单层通透性的影响及其调控机制。具体来说，将实验室培养的人动脉内皮细胞分为对照组和CREG过表达组，通过荧光显微镜观察细胞单层通透性的变化，评价CREG对内皮细胞单层通透性的影响。同时，通过Westernblot和RT-qPCR检测内皮细胞的相关分子表达水平，研究CREG对内皮细胞信号通路和通透性相关蛋白表达的影响，进一步探讨CREG调控内皮细胞单层通透性的机制。

三、研究方法和技术路线

（1）实验材料：人动脉内皮细胞、PCMV-CREG和空载体质粒、TRITC-dextran（分子量40kDa）

（2）实验步骤：

1）体外培养和细胞分组：将人动脉内皮细胞以适当的密度等量分配到对照组和CREG过表达组。

2）CREG过表达：将空载体和PCMV-CREG质粒转染入内皮细胞，达到CREG过表达的目的。

3）单层通透性实验：将TRITC-dextran添加到细胞培养液中，利用荧光显微镜观察内皮细胞单层通透性的变化，评价CREG对内皮细胞单层通透性的影响。

4）Westernblot和RT-qPCR：检测内皮细胞相关分子表达水平，研究CREG对内皮细胞信号通路和通透性相关蛋白表达的影响，进一步探讨CREG调控内皮细胞单层通透性的机制。

（3）技术路线：

图1研究方法和技术路线图

四、研究预期成果

本研究可望为动脉粥样硬化等心血管疾病的预防和治疗提供新的、有益的实验数据，明确CREG在内皮细胞单层通透性调控中的作用及其相关机制。同时，本研究也将为进一步研究CREG在动脉粥样硬化中的作用提供新的思路和方向。