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microRNA的电化学检测方法的建立及其应用的研究中期报告

已完成:

1.研究目标和意义

microRNA(miRNA)是一类长度约为20~24个核苷酸的短链RNA分子，广泛参与调控基因表达，与多种疾病密切相关。因此，建立一种快速、准确、灵敏的miRNA检测方法具有重要的临床应用价值和科学研究意义。电化学方法是一种灵敏、便捷、实用的检测方法，因此开发电化学方法检测miRNA已成为当前的热点研究。

2.是否需要修改研究方案

我们在研究过程中是否需要修改研究方案，需要根据实际情况进行判断。在目前研究中，我们遇到了如下问题：检测灵敏度不高、检测时间较长。因此，我们需要对实验参数进行优化以提高检测灵敏度和降低检测时间。

3.已完成工作

我们已经完成了下述工作：

1)构建了基因电化学检测平台，客观评估了不同蛋白酶的消化效果与RNA质量，并进行了优化；

2)研究了电化学传感器的表面修饰和miRNA探针的修饰方法，优化了电极表面修饰的条件，并进行了探针修饰实验；

3)优化了miRNA检测的实验条件，寻找了最佳检测条件（包括反应温度、反应时间、检测介质pH值），并进行了探针检测实验；

4)开发了一种新的电化学检测方法，可以提高检测灵敏度和降低检测时间。我们发现，在适当的温度和缓冲液条件下，引入去氧核糖核酸酶H(RNaseH)可以降低RNA沉积层表面的电荷密度，提高电子传递效率，从而增强检测灵敏度和缩短检测时间。

4.进一步计划

我们将进一步计划：

1)对新的电化学检测方法进行改进，提高其特异性和稳定性；

2)进行更多的实验，优化各种参数，提高检测灵敏度和降低检测时间。

3)测试和验证已优化的检测方法在不同样品中的可靠性和通用性，验证检测方法的实用性。

4)进一步优化检测方法的操作流程，使其更便捷、快速、准确。

5)系统探索电化学检测技术在miRNA检测中的应用前景。