丹参毛状根T-DNA插入突变本的筛选和丹参GGPP合酶基因的研究的开题报告.docxVIP

丹参毛状根T-DNA插入突变本的筛选和丹参GGPP合酶基因的研究的开题报告

一、研究背景

丹参（SalviamiltiorrhizaBunge）是一种传统中药材，广泛应用于治疗心血管疾病、肝炎及类风湿性关节炎等疾病。其中丹参的乳香酸、丹酚酸等花色苷类化合物是具有重要药理作用的有效成分。然而，丹参中这些花色苷类化合物的含量较低，制约了丹参的应用和开发。因此，开展丹参有效成分生物合成通路调控和代谢工程研究，是提高丹参产量和药理活性的重要途径。

二、研究内容

此次研究的主要内容为：利用T-DNA插入突变技术筛选丹参中的GGPP合酶（geranylgeranyldiphosphatesynthase）基因突变株，并研究其对花色苷类物质合成的影响。GGPP合酶是花色苷类化合物生物合成途径中的关键酶。通过筛选突变株，得到丹参中GGPP合酶的功能解析，对于理解丹参花色苷类化合物生物合成途径的调控机制、寻找提高丹参有效成分产量的策略和开发新型中药，具有重要的理论和实践意义。

三、研究方法

1.丹参的种子进行表面消毒处理后，进行T-DNA插入突变。

2.通过PCR筛选出T-DNA插入突变体，进行酶活测定和HPLC分析花色苷类化合物的含量，筛选出丹参GGPP合酶基因突变株。

3.通过生物信息学方法进行丹参GGPP合酶基因的生物信息分析。

4.利用qPCR、Westernblot等技术对突变株和野生型进行基因表达和蛋白质表达水平的比较分析。

四、研究意义及预期结果

本研究将利用T-DNA插入突变技术筛选出丹参GGPP合酶基因突变株，并探究其对花色苷类化合物合成过程的影响，探索丹参有效成分生物合成途径的调控机制。预计结果能为丹参有效成分生物合成途径的调控提供新思路，为丹参生产、开发提供科学依据。