50无菌检验或纯粹检验.ppt

无菌检验或纯粹检验根据《兽药典》规定，兽医生物制品（除另有规定者外）都不应有外源微生物污染，灭活疫苗不应含有活的本菌或本毒。各类生物制品必须按规定进行抽样作无菌检验或纯粹检验，全部操作应在无菌条件下进行。无菌检验或纯粹检验1.抽样对制造疫苗的各种原菌（毒）液和其他配苗组织乳剂、稳定剂及半成品，按每瓶（罐）分别抽样，抽样量为2～10mL。成品按每批瓶数的1%随机抽样，最少不少于5瓶，最多不抽过10瓶。无菌检验或纯粹检验2.检验用培养基（1）厌氧及需氧细菌检验用含硫乙醇酸盐培养基（T．G）及酪胨琼脂（G．A）；（2）霉菌及腐生菌检验用葡萄糖蛋白胨培养基（G．P）；（3）活菌纯粹检验用适于本菌生长的培养基；（4）杂菌计数用马丁琼脂或G．A；（5）病原性鉴定用T．G或其他适宜培养基。无菌检验或纯粹检验3.检验方法及结果测定（1）按《规程》中规定的方法进行检验无菌检验或纯粹检验（2）注意事项凡含有防腐剂、灭活剂或抗生素的产品必须用小瓶或大管培养基稀释后再移植培养；含有抗生素的冻干产品应稀释10倍后进行培养检查，以消除抗生素的影响；在厌氧菌检验时，除给予厌氧条件外，有些厌氧菌生长较缓慢，有些厌氧菌形成芽孢时间较长，故需适当延长培养时间才能获得确切的结果。无菌检验或纯粹检验例猪丹毒灭活疫苗的无菌检验50ml的TG37℃培养3d取培养物1ml待测制品各0.2ml于TG各0.2ml于GA斜面0.2ml于GP37℃25℃37℃25℃25℃要求:均培养5日，应无菌生长无菌检验或纯粹检验4.杂菌计数及病原性鉴定某些兽医生物制品，如绵羊痘活疫苗、鸡新城疫低毒力活疫苗等，按《兽药典》规定允许存在一定数量的非病原性杂菌，若经无菌或纯粹检验证明有杂菌，则必须对该制品进行病原性鉴定和杂菌计数后，才能对该制品做出合格与否的结论。无菌检验或纯粹检验（1）杂菌计数抽样（3瓶/批）分别作50倍稀释接种于平板上（2个平板/样品）37℃培养48h室温培养24h计录杂菌菌落数计算杂菌数如污染真菌时，也记为杂菌数。任何l瓶制品的非病原性杂菌不应超过《兽药典》的规定。无菌检验或纯粹检验(2)污染杂菌的病原性鉴定①污染需氧性细菌的检查37℃培养24h取培养0.1ml做100倍稀释皮下接种3只小鼠，0.2ml/只观察10天污染杂菌培养物移植T.G小管或马丁肉汤无菌检验或纯粹检验②污染厌氧性细菌的检查污染杂菌管延长培养至96h65℃加热30min再移植TG管或厌气肉肝汤将培养物肌肉接种2只豚鼠，1ml/只同条件下培养24-72h无菌检验或纯粹检验③判定结果上述接种动物均应健活。如有死亡或发生局部化脓、坏死，证明该批制品污染病原菌，应废弃全部制品。**