OPTN突变影响Htt蛋白共域结合调控RGC细胞BDNF表达的开题报告.docxVIP

OPTN突变影响Htt蛋白共域结合调控RGC细胞BDNF表达的开题报告

研究背景:

猎头蛋白(Htt)是尼日尔-荷兰脑脊髓炎(Huntingtondisease,HD)的发病基因，在正常情况下，Htt通过与细胞膜、运输蛋白或储存蛋白等相互作用，参与多个信号通路，调节细胞生命周期、分化或存活等过程。而在HD患者中，由于CAG三核苷酸重复扩增，在Htt的N-末端区域形成多聚体(aggregation)，导致神经退行性变和不可逆的神经元死亡。我们之前的研究已经证明，Htt有参与视网膜母细胞(ratretinalganglioncells,RGC)发育的作用，发现Htt会影响BDNF及其TRKB受体的表达，调节胶质细胞的分化及功能。但对于Htt和BDNF的调控机制尚未深入研究，有待于进一步探索。

研究目的:

本研究旨在探究Htt与BDNF之间的相关性，以及OPTN突变是否会影响Htt与BDNF的相互作用，深入研究Htt和BDNF在视网膜母细胞的共域结合作用及突变对其调节的影响，为HD的治疗提供有价值的临床思路。

研究内容:

1.慢病毒载体构建:构建Htt和BDNF的共表达载体，并设计Htt与BDNF的分离载体。

2.细胞实验:利用invitro的实验手段，分别将Htt与BDNF的共表达载体以及Htt或BDNF单独表达载体转染RGC细胞系中，并分别检测其对BDNF及TRKB的调节作用。同时来自HD患者的RGC细胞株被用于OPTN突变的GFP定位实验、共免疫共沉淀和荧光共振能量转移的分子生物学实验，以了解OPTN突变对Htt和BDNF之间相互作用的影响。

研究意义:

本研究将有助于深入研究Htt与BDNF及其TRKB受体之间的关系，进一步阐明Htt对RGC细胞BDNF调节的分子机制，并且阐述了OPTN突变对Htt和BDNF之间相互作用的影响，为HD治疗提供可靠的临床思路和研究基础，有望为从头开发新的治疗策略提供方向。