基因工程凝乳酶.ppt

基因工程凝乳酶汇报人：乔美玲组员：李文玉，崔蓬勃，孙浩**一凝乳酶简介凝乳酶是一种最早在未断奶的小牛胃液中发现的天门冬氨酸蛋白酶,可专一地切割乳中κ-酪蛋白的Phe105-Met106之间的肽键，破坏酪蛋白胶束使牛奶凝结。凝乳酶不仅可以凝乳，其在干酪成熟过程中也可起增加风味,改善营养等作用。凝乳酶按其来源可以分为动物凝乳酶、植物凝乳酶、微生物凝乳酶植物凝乳酶：包括木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶、生姜蛋白酶、合欢蛋白酶，蔬菜凝乳酶动物凝乳酶：小牛皱胃酶，猪胃蛋白酶，羔羊胃蛋白酶，水牛和骆驼的幼仔皱胃酶。微生物凝乳酶：野生菌株产凝乳酶（放线菌，真菌，细菌，酒曲中分离出的根霉和曲霉）和基因工程菌产凝乳酶。3**二基因工程凝乳酶★基因工程凝乳酶：采用基因工程技术,可将动物凝乳酶基因、植物凝乳酶基因等各类基因转入微生物中表达,获得外源表达凝乳酶。在1990年美国FDA已批准基因工程凝乳酶在乳酪生产中使用,FDA认可了3种凝乳酶产品:克氏乳酸菌凝乳酶,黑曲霉菌凝乳酶,大肠杆菌K-12凝乳酶。目前,可作为基因工程表达的宿主菌株主要为酵母菌、米曲毛霉、大肠杆菌。★★真核生物，目的蛋白分泌到胞外，表达量高，提取方便，易于规模化生产。原核生物，其表达的凝乳酶以包涵体形式存在，增加了分离提纯的难度。甲醇营养型巴斯德毕赤酵母宿主菌液态发酵胞外分泌目的蛋白（培养基上清液）离心除去菌体（粗酶液）提纯（硫酸铵盐析沉淀、离子交换柱、葡聚糖分子筛提纯）基因工程凝乳酶表达率高，（十倍甚至上百倍）；可自行修饰目的蛋白（对信号肽进行剪接，形成二硫键，适度糖基化）；成本低，易于商业化生产；不产生毒素，安全性高；***