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CHO细胞悬浮培养生产促红细胞生成素及工艺优化的开题报告

一、研究背景

促红细胞生成素（EPO）是一种天然的蛋白质激素，是红细胞生成的关键因子，可促进红细胞前体细胞分化为红细胞。EPO是从肾脏分泌的，随着研究的深入，研究人员发现EPO的合成并不仅限于肾脏，而且在其他器官和组织中也会出现。CHO细胞作为常用的重组蛋白表达系统，已被广泛应用于EPO的生产中。CHO细胞具有高效的蛋白质合成机制，可以大规模地表达异源蛋白质，使EPO的产量大大提高。

二、研究意义

EPO具有广泛的应用前景，除了用于治疗贫血外，还可用于促进肿瘤患者的免疫功能、促进神经保护等方面。因此，EPO的生产技术的优化和国产化研究具有重要意义。

三、研究内容

本项目将应用CHO细胞悬浮培养系统，对程序性优化进行研究，达到最佳工艺条件，以获得高产量的EPO。具体研究内容包括以下几个方面：

1.优化CHO细胞培养条件

通过调节培养基成分和工艺参数等因素，探索最佳CHO细胞培养条件，以达到CHO细胞增殖和EPO表达的最佳状态。

2.优化EPO表达构建体

选择目标基因和启动子，设计并构建EPO表达质粒，以提高EPO表达水平。

3.研究EPO产物纯化方法

探究最佳的EPO产物纯化方法，包括蛋白质层析、离子交换和超滤等技术。

4.研究EPO的生物学活性

通过相关实验方法，研究产生的EPO在体外和体内的生物学活性。

四、预期成果

通过本项目的研究，预期能够达到以下几个方面的成果：

1.确定最佳的CHO细胞培养条件，以获得高产量的EPO。

2.构建高效的EPO表达质粒，提高EPO表达水平。

3.筛选适宜的EPO产物纯化工艺，获得高纯度的EPO。

4.研究EPO的生物学活性及其药理特性。