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SiRNA沉默XIAP基因对骨肉瘤MG-63细胞生物学特性的影响中期报告
摘要
目的:探讨SiRNA沉默XIAP基因对骨肉瘤MG-63细胞生物学特性的影响。
方法:选取人类骨肉瘤MG-63细胞作为研究对象,通过随机分组实验,分别对无处理组、阴性对照组、脂质体对照组和SiRNA处理组进行处理,采用RT-PCR和Westernblotting方法检测XiapmRNA和Xiap蛋白表达水平。采用MTT法检测各处理组的细胞增殖情况,采用AnnexinV-FITC/PI双染尝法检测细胞凋亡率。最后,采用细胞迁移实验和基质侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力。
结果:经过SiRNA干预治疗,MG-63细胞中的XiapmRNA和Xiap蛋白表达均得到抑制,同时细胞增殖率随着SiRNA干预治疗时间的延长而减少,细胞凋亡率逐渐增加。此外,SiRNA处理组的细胞迁移和侵袭能力明显下降。
结论:SiRNA沉默XIAP基因可以抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖,促进细胞凋亡,并且降低细胞迁移和侵袭能力。
关键词:SiRNA;XIAP基因;骨肉瘤;生物学特性
Abstract
Objective:ToinvestigatetheeffectofsiRNA-mediatedsilencingofXIAPgeneonthebiologicalcharacteristicsofosteosarcomaMG-63cells.
Methods:HumanosteosarcomaMG-63cellswereselectedastheresearchobject.Randomizedgroupingexperimentwasconductedtotreatnotreatmentgroup,negativecontrolgroup,liposomecontrolgroupandSiRNAtreatmentgroup.RT-PCRandWesternblottingmethodwereusedtodetectXiapmRNAandXiapproteinexpressionlevels.MTTassaywasusedtodetectcellproliferationineachtreatmentgroup,andAnnexinV-FITC/PIdouble-stainingmethodwasusedtodetectcellapoptosisrate.Finally,cellmigrationandinvasionabilityweredetectedbycellmigrationandmatrixinvasionexperiments.
Results:AfterSiRNAintervention,theexpressionofXiapmRNAandXiapproteininMG-63cellswasinhibited,andthecellproliferationratedecreasedwiththeprolongationofSiRNAinterventiontime,andthecellapoptosisrategraduallyincreased.Moreover,themigrationandinvasionabilityofSiRNAtreatmentgroupweresignificantlyreduced.
Conclusion:SiRNA-mediatedsilencingofXIAPgenecaninhibittheproliferationofosteosarcomaMG-63cells,promotecellapoptosis,andreducecellmigrationandinvasionability.
Keywords:SiRNA;XIAPgene;osteosarcoma;biologicalcharacteristics.
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