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Ad535mCD20载体的构建及鉴定的开题报告

开题报告：

题目：Ad535mCD20载体的构建及鉴定

一、研究背景

目前，基因治疗已经成为治疗多种疾病的重要手段之一。腺病毒介导基因转移已经成为实现基因治疗的主流方法之一。其中，腺病毒五型中的腺病毒5（Ad5）已经成为常用的基因转移工具。Ad5具有良好的基因携带能力、高度的基因表达水平、广泛的宿主细胞类型等特点。因此，构建Ad5基因转移载体，成为开展腺病毒介导的基因治疗的关键步骤。CD20是一种针对B细胞表面的特异性抗原，已经广泛应用于B细胞恶性肿瘤、自身免疫性疾病等治疗领域。

二、研究目的

本研究旨在构建Ad5载体，用于携带mCD20并表达该抗原的目的，以验证其能否真实表达mCD20，并为后续的基因治疗研究提供理论依据。

三、研究内容

1.构建Ad5载体

采用基因重组技术，将Ad5的DNA质粒与目的基因mCD20的DNA质粒进行重组，构建携带mCD20的Ad5载体。

2.鉴定Ad5载体

通过PCR等方法对构建的Ad5载体进行鉴定，验证其是否符合预期。

3.验证mCD20表达

将构建的Ad5载体转染至B细胞中，通过Westernblot等方法对mCD20的表达进行鉴定，验证其是否真实表达了mCD20。

四、预期结果

1.成功构建携带mCD20的Ad5载体

2.验证构建的Ad5载体符合预期

3.验证构建的Ad5载体能够真实表达mCD20

五、研究意义

本研究将构建一种新型的基因治疗载体，为后续的基因治疗研究提供理论依据，并为临床治疗提供新的方法和技术手段。同时，该载体的成功构建与应用，也将有助于促进基因治疗技术的发展和应用。

六、进度安排

第一年：完成Ad5载体构建及鉴定

第二年：完成mCD20的表达验证

第三年：撰写论文并提交

七、参考文献

1.DaiS,etal.CD20:anattractivetargetfortreatingautoimmunediseases[J].AutoimmunRev,2009,8(7):585-591.

2.MukherjeeP,etal.Developmentofadenovirusserotype35asagenetransfervector[J].Virology,2010,398(2):167-75.

3.VermaIM,etal.Genetherapy-promises,problemsandprospects[J].Nature,2011,35(7):585-591.