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LOX-1体外研究模型的建立及其功能检测的开题报告

一、论文选题背景

氧化低密度脂蛋白受体1（lymphocyteoxidizedLDLreceptor-1,LOX-1）是一种单一跨膜蛋白，可通过结合低密度脂蛋白的氧化产物，发挥介导炎症反应、促进血管内皮细胞凋亡、参与脂代谢和动脉粥样硬化等生物学功能，是一种新型的危险因素与治疗靶点。因此，建立LOX-1体外研究模型进行其功能检测具有重要意义。

二、研究目的

本文主要研究目的是利用质粒转染技术，构建LOX-1高表达的细胞模型，采用Westernblotting、流式细胞术、蛋白质交联等技术手段，分析并验证该体外细胞模型对LOX-1特异性结合、内源性表达及氧化低密度脂蛋白的介导影响等功能。

三、研究内容和方法

1.质粒构建：将LOX-1cDNA克隆到真核表达质粒载体上，经过序列验证后转染入HEK293E细胞中。

2.Westernblotting：将采集的细胞样品经过蛋白质电泳分离，转移到PVDF膜上，用LOX-1特异抗体进行植物过表达蛋白的检测，并以β-actin作为内部对照。

3.流式细胞术：用流式细胞术检测LOX-1在单个细胞上的表达情况，并用氧化低密度脂蛋白进行刺激，观察对LOX-1的影响。

4.蛋白质交联：利用可交联化学物质对细胞和膜上的LOX-1进行交联，并进行Westernblotting检测LOX-1的交联情况。

四、研究意义

本文将建立LOX-1高表达细胞模型，为进一步研究其功能及发挥作用提供了必要条件，并为LOX-1作为新型危险因素和治疗靶点的相关研究提供了一定的参考意义。