食品毒理学实验基础.ppt

亚慢性试验观察指标1、一般性指标1）.一般综合性观察指标①动物体重②食物利用率③症状④脏器系数2）.一般化验指标主要指血象和肝、肾功能的检测，在亚慢性试验中研究外来化合物对实验动物的毒性作用。2、病理学检查慢性试验其中包括体重、食物摄取、临床症状、行为、血象和血液化学、尿的性状及生化成分以及重点观察在亚慢性毒性试验中已经显现的阳性指标。第64页,共80页，星期六，2024年，5月五、实验动物处死及生物标本采集实验动物处死方法大小鼠可用颈椎脱臼法，然后股动脉放血。兔、豚鼠、狗等一般用股动脉放血处死。血液采集不影响动物生理功能的最大取血量为其总血量(50ml/kg体重)的10％。尿液采集大小鼠可用代谢笼，下部有粪尿分离器。狗可用接尿法或导尿法。第65页,共80页，星期六，2024年，5月病理解剖和标本留取?毒性病理学检查是毒理学试验重要的组成部分，病理学研究有助于确定有害作用和靶器官。大体解剖：在实验动物处死后半小时内进行。观察有关脏器的外形和表面情况、颜色、边界和大小、质地、切面。对指定的脏器称重，并计算脏器系数。组织病理学检查：对指定的器官或组织用锋利的刀剪取材，应统一取材部位。组织块一般在10倍体积的10％福尔马林中固定，此后常规制片(组织石蜡包埋、切片、HE染色)。应详细记录显微镜下观察到的病变，并做出病理诊断。第66页,共80页，星期六，2024年，5月第67页,共80页，星期六，2024年，5月第六节体外试验在毒理学中的应用?体外试验模型(invitrotest)在判断外源化学物及其制品和混合物等对人类健康是否具有损害作用过程中也起着重要的作用。原因：量大全世界每年约有千种以上的新化合物作为商品进入人类的环境。而且在现有的化合物中，还有相当数量没有进行必要的毒理学评价。节省时间和经费动物保护主义运动的兴起生物技术为毒性试验和研究提供的新方法和工具第68页,共80页，星期六，2024年，5月一、概述???(一)分类依据体外试验在决策过程中所起的作用将其分为3类：①筛选试验仅提供决策过程的最初的资料②附加试验为协作部门或法律部门的最终决策过程提供有用的资料③替代试验在大量实验的基础上，使体外毒性试验能替代整体动物试验第69页,共80页，星期六，2024年，5月(二)基本原理体外试验的基本原理是——所观察到的毒理学效应均是毒物和／或反应活性代谢产物在敏感性细胞上或敏感细胞内某一分子靶部位作用的结果。基于上述原理，体外试验模型取材范围很宽。第70页,共80页，星期六，2024年，5月(三)体外试验的优缺点体外毒性试验系统的优点能控制环境因素可排除相互作用的系统如免疫系统、神经内分泌系统的影响每一剂量水平可利用大量的生物样品，如细胞，细胞器等试验间的误差较少可同时和／或反复多次取样可做成复杂的互相作用的试验系统，如复合细胞培养等较为快速和经济需要较小量的受试化合物产生较小量的有毒废物可以利用人体细胞减少整体动物的使用第71页,共80页，星期六，2024年，5月其中特别值得一提的优点是体外试验的简便和易于利用人体细胞。体外毒性试验结果可迅速得出，将减少了解新化学物毒理学资料所需的时间，最终可以缩短从新化学物的合成到产品进人市场的时间过程。此外，对鉴定毒理学资料有问题的新化学物，可及时终止开发，减少由资源到产品的投入。在毒理学整体试验中禁止直接进行人体试验。目前主要是将动物试验结果外推至人类，物种间差异为其不确定因素之一。在体外试验中，利用人体细胞组织进行试验，可较好地解决物种差异的问题。第72页,共80页，星期六，2024年，5月不足之处：①体外到体内外推的问题体外试验是依据毒性作用的始发阶段及继续发生的分子与细胞反应，其与整体系统有差异。另一方面，体外毒性试验中缺乏毒理学反应的调控因素。②体外毒性试验难以预测慢性毒性因为，慢性毒性病理过程的机理所知甚少，缺乏发展体外试验的理论依据，再者，某些体外系统仍难以达到长期维持生理状态的要求。第73页,共80页，星期六，2024年，5月二、体外试验系统(一)脏器灌流肝脏灌流是毒理学中研究外源化合物对肝脏损伤及代谢的常见方法。在灌流液中加入外源化学物，此外要