酵母菌种群数量探究实验.pdfVIP

六、探究培养液酵母菌种群数量的变化

1.实验目的

初步学会酵母菌等微生物的计数及种群数量

变化曲线的绘制；

2.实验原理

用液体培养基（培养液）培养酵母菌，种群

的增长受培养液的成分、空间、pH、温度等

因素的影响；

3.提出问题

培养液酵母菌种群的数量是怎样随时间变

化的？

4.材料用具

酵母菌、无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、

试管、血细胞计数板、滴管、显微镜等

5.讨论思路

（1）血细胞计数板构造

大方格的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，

3

1mm×1mm×0.1mm，其容积为0.1mm；计

数室通常有两种规格：

16×25型：

大方格内分为16格，每一格又分

25

为小格

25×16型：

大方格内分为25格，每一格又分

16

为小格

不管计数室是哪一种构，其每一大方格

都是由16×25=25×16=400个小方格组成

B.C为两种不同计数室的取样方法不同

（2）怎样对酵母菌进行计数？

可以采用抽样检测的方法：

先将盖玻片放在血细胞计数板的计数室

上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，

让培养液自行渗入。

多余的培养液用滤纸吸去。

稍待片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底

部；

将计数板放在载物台的央；

计数一个小方格内的酵母菌数量，在以此

为根据估算酵母菌数量

（3）怎么计算酵母及数量？

A

假设小方格酵母菌数量的平均值是个，稀释

B,

倍数为求每毫升培养液酵母菌的数量：

说明：大方格体积=0.1立方毫米，每个大方

格共分为25个方格，共有25×16=400个

小方格

大方格酵母菌数量=A×400×10×1000×B

现学现用：

通常用血球计数板对培养液酵母菌进

行计数，若计数室为1mm×1mm×0.1mm

方格，由400个小方格组成。若多次重

复计数后，算得每个小方格平均有5

个酵母菌，则10mL该培养液酵母菌

总数有______个

（4）从试管吸出培养液进行计数之前,建

议将试管轻轻振荡几次这是为什么？

使培养液酵母菌分布均匀,以减少误差

（5）如果一个小方格内酵母菌数量过多，难

以数清，应当采取什么措施

稀释适当倍数

（6）对于压在小方格界线上的酵母菌应当怎

样计数?

只计相邻两边及其顶角上的酵母菌,

一般遵循“计上不计下,计左不计右”的原则

（7）本实验需要设置对照吗?

不需要对照,实验前后互为对照

（8）需要做重复实验吗?

需要重复实验,以提高实验数据的准确性;

对每个样品可计数三次，再取平均值

（9）怎么分辨死细胞和有活性的细胞？

死细胞多集结成团；

可以借助台盼蓝染色（死细胞呈蓝色）

6.实施计划

首先通过显微镜观察，估算出10mL培养液

酵母菌的初始数量（N），在此之后连续观察

0

7天，分布记录下这7天的数值

7.分析结果，得出结论

实验结论：

在适宜条件下，酵母菌种群呈“S”形增

长；

种群的增长速率是：先增加后减少，在

K/2时增长速率最大

8.进一步探究：温度或者营养物质对酵母菌

数量的影响

试培养无菌酵母温度（℃）

管液/mL水/mL菌母

编液/mL1200

1000

号1

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80L00