KJ 201705 水产品中硝基呋喃类代谢物的快速检测胶体金免疫层析法.docxVIP

附件?5

水产品中硝基呋喃类代谢物的快速检测

胶体金免疫层析法（KJ201705）

1 范围

本方法规定了水产品中硝基呋喃类代谢物快速检测方法。

本方法适用鱼肉、虾肉、蟹肉等水产品中呋喃唑酮代谢物（AOZ）、呋喃它酮代谢物（AMOZ）、

呋喃西林代谢物（SEM）、呋喃妥因代谢物（AHD）的快速测定。

2 原理

样品中硝基呋喃类代谢物经衍生处理后，其衍生物与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制抗

体和检测卡/试纸条中检测线（T?线）上硝基呋喃类代谢物-BSA?偶联物的免疫反应，从而导致检

测线颜色深浅的变化。通过检测线与控制线（C?线）颜色深浅比较，对样品中硝基呋喃类代谢物

进行定性判定。

3 试剂和材料

除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为?GB/T?6682?规定的二级水。

3.1 试剂

3.1.1 盐酸。

3.1.2 三水合磷酸氢二钾。

3.1.3 氢氧化钠。

3.1.4 甲醇。

3.1.5 乙醇。

3.1.6 乙腈。

3.1.7 邻硝基苯甲醛。

3.1.8 三羟甲基氨基甲烷。

3.1.9 乙酸乙酯。

3.1.10 正己烷。

3.1.11 邻硝基苯甲醛溶液（10mmol/L）:准确称取?0.150g?邻硝基苯甲醛，用甲醇（3.1.4）溶解并

定容至?100mL。

3.1.12 磷酸氢二钾溶液（0.1mol/L）：准确称取?22.822g?三水合磷酸氢二钾（3.1.2），用水溶解

并定容至?1000mL。

中文名称

英文名称

CAS?登录号

分子式

相对分子量

3-氨基-2-恶唑烷酮

3-anmino-2-oxazoli

dinone,AOZ

80-65-9

C3H6N2O2

102.09

5-甲基吗啉-3-氨基

-2-唑烷基酮

5-morpholine-meth

yl-3-amino-2-oxazo

lidinone,AMOZ

43056-63-9

C8H15N3O3

201.22

1-氨基-2-乙内酰脲

盐酸盐

1-Aminohydantoinh

ydrochloride,AHD

2827-56-7

C3H5N3O2·HCl

151.55

氨基脲盐酸盐

semicarbazidhydroc

hloride,SEM

563-41-7

NH2CONHNH2·HCl

111.53

3.1.13 氢氧化钠溶液（1mol/L）：准确称?39.996g?氢氧化钠（3.1.3），用水溶解并稀释至?1000mL。

3.1.14 盐酸溶液（1mol/L）：取?10mL?盐酸（3.1.1）加入到?110mL?水中。

3.1.15 三羟甲基氨基甲烷溶液（10mmol/L）：准确称取?1.211g?三羟甲基氨基甲烷（3.1.8），溶

于?80mL?水中，加入盐酸（约?42mL）调?pH?至?8.0?后用水定容至?1L。

3.2 参考物质

3.2.1 硝基呋喃类代谢物参考物质的中文名称、英文名称、CAS?登录号、分子式、相对分子量见

表?1，纯度≥99%。

表?1 硝基呋喃类代谢物参考物质的中文名称、英文名称、

表?1 硝基呋喃类代谢物参考物质的中文名称、英文名称、CAS?登录号、分子式、相对分子量

注：或等同可溯源物质。

3.3.1 标准储备液：分别准确称取适量参考物质（精确至?0.0001g），用乙腈溶解，配制成?100mg/L

的标准储备液。-20℃冷冻避光保存，有效期?12?个月。

43.3.2 混合中间标准溶液：准确移取标准储备液（3.3.1）各?1mL?于?100mL?容量瓶中，用乙腈定

4

容至刻度，配制成浓度为?1mg/L?的混合中间标准溶液。4℃冷藏避光保存，有效期?3?个月。

3.3.3 混合标准工作溶液：准确移取?0.1mL?混合中间标准溶液（3.3.2）于?10mL?容量瓶中，用乙

腈定容至刻度，配制成浓度为?0.01mg/L?的混合标准工作溶液。?℃冷藏避光保存，有效期?1?个月。

3.4 材料

3.4.1 AOZ?试剂盒（含胶体金试纸条或检测卡及配套的试剂）。

3.4.2 AMOZ?试剂盒（含胶体金试纸条或检测卡及配套的试剂）。

3.4.3 SEM?试剂盒（含胶体金试纸条或检测卡及配套的试剂）。

3.4.4 AHD?试剂盒（含胶体金试纸条或检测卡及配套的试剂）。

3.4.5 固相萃取柱（强阴离子交换型）：规格?1mL，填装量为?60mg。

4 仪器和设备

4.1 电子天平：感量分别为?0.1g?和?0.0001g。

4.2 均质器。

4.3 水浴箱。

4.4 离心机。

4.5 氮吹仪或空气吹干仪。

4.6 移液枪：10μL，100μL，1000μL，5000μL。

4.7 涡旋振荡仪。

4.8 胶体金读数仪（可选）。

4.9 固相萃取装置（可选）。

4.10 环境条件：温度?15-35℃，湿度≤80%。

5 分析