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犬血涂片实验报告
实验原理
犬血的血细胞经涂片、固定和染色后,可体现出不同发育阶段
及病理生理改变的白细胞,在细胞体积、细胞质成分及酸碱性、细
胞核染色质含量及空间排列状态的差异,借助显微镜对上述差异进
行总体分析而将各种白细胞区别开来。
成熟红细胞不含细胞核,细胞质的主要成分是血红蛋白,略呈
碱性。制成血涂片经瑞-吉染色后,血红蛋白与染液中呈酸性的伊红
结合而显桔红色或淡粉红色。同时也展现出红细胞的各种形态学特
点。
试剂器材
1.试剂:香柏油、二甲苯或乙醇—乙醚清洁液
2.器材:经瑞氏染色的犬血涂片、拭镜纸、目镜测微尺。
操作步骤
1.肉眼观察犬血涂片的外观和染色情况,正面向上置于显微镜
载物台上。
2.镜检
(1)调试好显微镜。
(2)低倍镜观察:采用10×目镜观察犬血涂片的质量,选择细
胞分布均匀、染色良好、细胞排列不拥挤(即红细胞单个分散不重叠)
的区域(一般在血涂片的体尾交界处),准备进一步检测。
(3)高倍镜观察:转换40×目镜,整体观察犬血涂片细胞着色,
有无特殊细胞。
(4)油镜观察:在选定的观察区域,滴加香柏油1滴,转换油
镜,仔细观察白细胞的形态结构,红细胞的大小、形态是否正常,
细胞内有无内容物,以及血红蛋白的充盈度和着色是否正常。同时
作好记录。
2.结果统计与报告白细胞分类计数百分比报,对异常形态白
细胞描述;对所见大小、形态异常的红细胞及有核红细胞按百分比
报告;红细胞内出现异常结构及血红蛋白充盈度异常和着色异常者
按有或无报告。
注意事项
应用低倍镜浏览全片,特别是血膜的两侧和尾部,以防异常成
分漏检。参考范围
一、镜下所见正常白细胞形态:
1.中性粒细胞成熟的中性粒细胞胞体呈圆形,直径10μm
~15μm,细胞核呈分叶和单个杆状两种形态。核染色质疏密不匀,
部分聚集成块状,dna和组蛋白分别被美蓝和伊红着色染成深紫红色。
细胞质内因充满大量细腻均匀的紫红色中性颗粒,染色后呈均一的
呈粉红色。一般以核径最窄处小于最宽处1/3者,视为分叶核;核
径最窄处大于最宽处1/3即为杆状核。中性杆状核粒细胞核形多样,
胞核细长,弯曲,可呈c形、s形、v形或不规则形。中性分叶核粒
细胞细胞核分2叶~5叶,甚至5叶以上,叶间以核丝或核桥相连。
2.嗜酸性粒细胞细胞体呈圆形,直径约13μm~15μm,略大
于中性粒细胞。细胞核多分为两叶,中间以细丝相连呈“眼镜”状,
偶见分为3叶~4叶者。细胞核染色质粗糙,染成紫红色。胞质中充
满粗大、均匀的桔红色嗜酸性颗粒,颗粒富有立体感,排列整齐、
紧密。
3.嗜碱性粒细胞细胞体呈圆形,直径约10μm~12μm,略小
于中性粒细胞。细胞核着色较浅,呈淡红色,分叶不明显,形态不
规则。胞质较少,含有少量粗大的紫黑色嗜碱性颗粒,颗粒大小不
均、排列不整齐,常覆盖于细胞核上而使细胞核外形及染色质结构
不易观察。
4.单核细胞为周围血中最大的白细胞。胞体呈圆形或不规则
形,直径约15μm~25μm。细胞核大且不规则,为肾形、马蹄形、
蚕蛹状或不规则形,扭曲折叠;核染色质纤细、疏松如网状,染淡
紫红色。细胞质丰富,染淡蓝或灰蓝色,半透明,偶可出现空泡。
部分细胞含有弥散分布、数量不等的嗜天青颗粒,颗粒呈紫红色、
细小灰尘样。
5.淋巴细胞胞体呈圆形或椭圆形,小淋巴细胞直径约6μm
~10μm,大淋巴细胞直径约10μm~15μm。细胞核外形规则,呈圆
形或椭圆形,偶见凹陷,多偏向一侧。核染色质呈深紫红色、板块
状排列。核膜较厚,偶见核仁。小淋巴细胞胞质很少,有的仅在核
的一侧出现一线天蓝或深蓝色胞质,甚至完全不见,一般无颗粒;
大淋巴细胞胞质较小淋巴细胞丰富,呈透明蓝色,常有少量粗大、
稀疏、大小不等的紫红色嗜天青颗粒。
二、正常红细胞呈双凹圆盘形,细胞大小均一,平均直径7.2μ
m(6.7μm~7.7μm);油镜下,瑞氏染色红细胞为淡粉红色,血红
蛋白充盈良好,有过渡平滑的向心性淡染,中央部位为生理性淡染
区,其大小约为直径的1/3;细胞内无异常结构及细胞核;无寄生虫。
高倍镜下所有红细胞的颜色趋于一致。
临床意义
一、异常白细胞形态:
1.
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