分析化学：生物传感器.ppt

三.敏感器件（分子识别元件）1．酶（Enzyme）及酶电极(1).酶的催化特性酶是生物体内产生并具有催化活性的一类蛋白质。此类蛋白质表现出特异的催化功能，因此，酶被称为生物催化剂．酶在生命活动中起着极为重要的作用，它们参加新陈代一谢过程中的所有生化反应，并以极高的速度和明显的方向性维持生命的代谢活动，包括生长、发育、繁殖与运动．可以说，没有酶生命将不复存在．目前已鉴定出的酶有2000余种，其中一半左右已达均一纯度，100余种已能制得晶体。酶与一般催化剂相同，在相对浓度较低时，仅能影响化学反应的速度，而不改变反应的平衡点，反应前后其组成与质量均不发生明显改变．酶与一般催化剂的不同点如下：(1).酶的催化效率比一般的催化剂高106—1O13倍。(2).酶催化反应条件较为温和，在常温常压近中性条件下即可进行.(3).酶的催化具有高度的专一性.1).立体化学专一性．它又可分为：（a）光学专一性．所谓光学专一性是指一种酶只能催化一对镜像异构体之一，对另一异构体则不起催化作用．如精氨酸酶只催化L一精氨酸水解产生L一乌氨酸和尿素，对D一精氨酸则无效．（b）几何专一性．所谓几何专一性是指酶只能作用顺式或反式异构体中的某一个．如延胡索酸是一种反式的丁烯二酸，而马来酸则为顺式的丁烯二酸．延胡索酸酶只能催化延胡索酸水解产生苹果酸，而不作用于马来酸．2）非立体化学专一性

非立体化学专一性可依据酶对底物的三种组成部分选程度的不同分为三类：(a).键专一性(b).基团专一性(c).绝对专一性具有绝对专一性的酶要求底物的键及A与B严格地适宜，否则不起催化作用．绝对专一性典型的例证是脲酶，且只能催化尿素水解，对尿素的衍生物则无催化作用.(2).酶的本质和分类

酶是一类有催化活性的蛋白质.酶可分为单纯蛋白酶与结合蛋白酶两大类．单纯蛋白酶除蛋白质以外不含其它成分．如胃蛋白酶、胰蛋白酶和脲酶等．结合蛋白酶是由蛋白和非蛋白两部分所组成．非蛋白部分若与酶蛋白结合牢固，不易分离则称辅基·如细胞色素氧化酶中的铁卟啉部分，用透析法不能将其与酶蛋白部分分开，故称铁卟啉部分为辅基．若非蛋白部分与酶蛋白结合不牢，易于分开，在溶液中呈离解平衡状态，则称为辅酶．常见的辅酶有烟酰胺腺瞟吟二核苷酸（NAD，辅酶Ⅰ）和烟酰胺腺瞟吟二核昔酸磷酸（NADP，辅酶Ⅱ），二者均称为脱氢酶的辅酶．辅基与辅酶多为维生素或某些金属（Cu、Fe、Mg、Zn、Co、Mn、Mo等）的配合物。(3).酶的活力单位（酶单位）1）标准酶单位国际生物化学协会酶委员会规定了酶单位的标准形式为：一个酶单位（U）是在特定的条件下lmin内催化形成1μmol产物的酶量（或转化1mo1底物的酶量）．特定条件一般是指选定的条件，如温度为25℃，30℃，37℃，最适pH,底物为饱和溶液．2）酶的比活力

每毫克蛋白质所含某酶的活力单位数称某酶的比活力．3）酶浓度每毫升酶蛋白溶液所含某酶的活力单位数称某酶浓度．一定重量或一定体积酶制剂所具有的酶活力单位数叫做总活力．在酶的提纯过程中，总活力逐渐下降，比活力逐渐提高．4）转换值

也称分子活力或摩尔活力．其定义是1摩尔酶在最适条件下，1min内所转化的底物的摩尔数．转化值的单位为min-1．转换值的倒数是一个催化循环所需要的时间．

(4).酶的固定化技术固定化酶使酶的利用率、稳定性与机械强度等方面均较可溶性酶有所提高，使用固定化酶为酶电极的制备提供了良好的条件．1.惰性载体——物理吸附法

此法是酶分子通过极性键、氢键、疏水力或π电子相互作用等吸附于不溶性载体上．常用的载体有：多孔玻璃、活性炭、氧化铝、石英砂、纤维素酯（包括硝酸纤维素、醋酸纤维素）、葡聚糖、琼脂精、聚氯乙烯、聚苯乙烯等，已用此法固定化的酶如：脂肪酶、α－D葡萄糖苷酶、过氧化物酶等．2.离子载体—交换法选用具有离子交换剂的载体，在适宜的pH下，使酶分子与离子交换剂通过离子键结合起来，形成固定化酶．常用的带有离子交换剂的载体如下DEAE一纤维素、TEAE一纤维素、AE—纤维素、CM—纤维素、DEAE一葡萄糖、肌酸激酶等．3．活化载体—共价结合法a.重氮法b.迭氮法c.卤化氰法．d.缩合法e.烷基化法8.3生物传感器

(Biosensor)一．概述1．定义传感器—能感受(或响应)