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1.2基因工程的基本操作程序;;一、目的基因的获取;一、目的基因的获取;;提取某种生物的全部DNA;某种生物的单链mRNA;;概念:PCR全称为_______________,是一项
在生物____复制___________的核酸合成技术;四种脱氧核苷酸(dNTP);过程;2、具体过程;PCR(多聚酶链式反映) ;①概念:PCR全称为_______________,是一项
在生物____复制___________的核酸合成技术;⑥过程:;PCR技术扩增与DNA复制的比较;目的基因的mRNA;二、基因体现载体的构建
——基因工程的核心;2、基因体现载体的构成:;启动子:位于基因的首端的一段特殊的DNA片断,它是RNA聚合酶识别和结合的部位,有了它才干驱动基因转录出mRNA,最后获得蛋白质
终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断,能终止mRNA的转录
标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中与否含有目的基因,从而将有目的基因的细胞筛选出来;①载体与体现载体的区别:两者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。体现载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分构造
②用到的工具酶:既用到限制酶切割载体,又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接,两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键
③启动子、终止子对于目的基因体现必不可少
④目的基因不能单独进入受体细胞,必需以体现载体的方式携带进去。;三、将目的基因导入受体细胞;1、将目的基因导入植物细胞的办法:
(1)农杆菌转化法
①农杆菌特点:;③过程:;(2)基因枪法
(3)花粉管通道法;2、将目的基因导入动物细胞
①办法:显微注射法
②程序:;
3、将目的基因导入微生物细胞
①原核生物特点:繁殖快、单细胞、遗传物质少
②办法:
;四、目的基因的检测与鉴定;(一)、检测;归纳环节;DNA分子杂交示意图;(二)、鉴定(个体生物学水平);归纳环节;(四)目的基因的检测与鉴定;归纳:基因工程的基本操作程序;练习1:(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积,增加粮食产量,黄河三角洲等盐碱地的开发运用备受关注。我国科学家应用耐盐基因哺育出了耐盐水稻新品系。
(1)获得耐盐基因后,构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的处,DNA连接酶???用于处。(填“a”或“b”);练习1:(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积,增加粮食产量,黄河三角洲等盐碱地的开发运用备受关注。我国科学家应用耐盐基因哺育出了耐盐水稻新品系。
(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的惯用办法有农杆菌转化法和法。
(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要运用技术,该技术的核心是和。
(4)为了拟定耐盐转基因水稻与否哺育成功,既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测,又要用办法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。;1)下列说法对的的是()
A、全部的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列
B、质粒是基因工程中唯一的运载体
C、运载体必须含有的条件之一是:含有多个限制酶切点,方便与外源基因连接
D、基因控制的性状都能在后裔体现出来;2)不属于质粒被选为基因运载体的理由是
A、能复制()
B、有多个限制酶切点
C、含有标记基因
D、它是环状DNA;3)有关基因工程的叙述中,错误的是()
A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来
B、限制性内切酶用于目的基因的获得
C、目的基因须由运载体导入受体细胞
D、人工合成目的基因不用限制性内切酶;4)有关基因工程的叙述对的的是()
A、限制酶只在获得目的基因时才用
B、重组质粒的形成在细胞内完毕
C、质粒都可作为运载体
D、蛋白质的构造可为合成目的基因提供资料;5)基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本环节中,不进行碱基互补配对的环节是
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