细胞增殖及其调控 (5).ppt

同类M期细胞可以诱导PCC不同类的M期细胞也可以诱导PCC产生，如人和蟾蜍的细胞融合时同样有PCC产生即说明M期细胞具有某种促进间期细胞进行分裂的因子，即成熟促进因子(MPF)1、细胞分裂有关的基因（CDC）1960sLelandHartwell（利兰·哈特韦尔）以芽殖酵母为实验材料分离出了细胞分裂有关的基因(celldivisioncyclegene，CDC)。如芽殖酵母的cdc28基因，在G2/M转换点发挥重要的功能Hartwell还提出了checkpoint（细胞周期检验点）的概念，指当DNA受到损伤时，细胞周期会停下来1970sPaulNurse等人分离出了裂殖酵母cdc2、cdc25第31页,共42页，星期六，2024年，5月2、周期蛋白(cyclin)：1983年TimothyHunt（蒂莫西·亨特）首次发现海胆卵受精后，在其卵裂过程中两种蛋白质的含量随细胞周期剧烈振荡在每一轮间期开始合成，G2/M时达到高峰，M结束后突然消失，下轮间期又重新合成，故命名为周期蛋白(cyclin)3、MPF的实质1988年M.J.Lohka纯化了爪蟾的MPF，经鉴定由32KD和45KD两种蛋白组成，二者结合可使多种蛋白质磷酸化后来PaulNurse（1990）进一步的实验证明P32实际上是CDC2的同源物，而P45是cyclinB的同源物，从而将细胞周期三个领域的研究联系在一起即MPF=CDC2+CyclinBMPF的实质第32页,共42页，星期六，2024年，5月2001年诺贝尔生理学与医学奖授予了美国科学家利兰·哈特韦尔细胞分裂有关的基因（CDC）英国科学家蒂莫西·亨特周期蛋白(cyclin)英国科学家保罗·纳西MPF的实质：MPF=CDC2+CyclinB以表彰他们发现了细胞周期的关键调节机制第33页,共42页，星期六，2024年，5月MPFMPF的结构：MPF=CDC2+CyclinBMPF是两个不同的亚基组成的异质二聚体1、CDC2是催化亚基（CDC基因所编码的蛋白质）,要与细胞周期蛋白结合才具有激酶的活性它能够将磷酸基团从ATP转移到特定底物的丝氨酸和苏氨酸残基上,这种蛋白激酶后来被称为周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentkinases,Cdks)目前发现的CDK在动物中有7种。各种CDK分子均含有一段相似的激酶结构域，这一区域（即PSTAIRE）与周期蛋白的结合有关因此CDC2又被称为CDK1，激活的CDK1可将靶蛋白磷酸化而产生相应的生理效应，如将核纤层蛋白磷酸化导致核纤层解体、核膜消失，将H1磷酸化导致染色体的凝缩等等第34页,共42页，星期六，2024年，5月2、另一个亚基称作周期蛋白(cyclin)周期蛋白不仅仅起激活CDK的作用，还决定了CDK何时、何处、将何种底物磷酸化，从而推动细胞周期的前进这种周期性变化是靠对周期蛋白的降解来调控的周期蛋白的降解是通过对后期促进复合物（也叫后期促进因子）(anaphase-promotingcomplex,APC)活性的控制进行调节的。APC作用是将泛素（也叫遍在蛋白）连接到周期蛋白上来启动周期蛋白的降解具有较高活性的APC复合物中有几个亚基是被磷酸化的通过调控APC的磷酸化来控制周期蛋白的泛素化从而控制周期蛋白的降解MPF的活性在细胞周期中波动很大,在有丝分裂前急剧升高,但在有丝分裂后急剧下降直到零原因是：周期蛋白浓度在细胞周期中呈周期性变化第35页,共42页，星期六，2024年，5月周期细胞中有丝分裂周期蛋白水平的调节第36页,共42页，星期六，2024年，5月不同类型的周期蛋白激酶复合体（MPF）脊椎动物芽殖酵母CyclinCDKCyclinCDKG1-CDKCyclinD*CDK4、6Cln3CDK1(CDC28)G1/S-CDKCyclinECDK2Cln1、2CDK1(CDC28)S-CDKCyclinACDK2Clb5、6CDK1(CDC28)M-CDKCyclinBCDK1(CDC2)Clb1-4CDK1(CDC28)第37页,共42页，星期六，2024年，5月周期蛋白连接泛素详细过程E1、E2、E3的参与（不作要求）第38页,共42页，星期六，2024年，5月细胞周期检验点细胞要分裂，必须正确复制DNA和达到一定的体积，在获得足够物质支持分裂以前，细胞不可能进