《GBT 41895-2022细胞中DNA病毒测定 MNP标记法》最新解读.pptx

《GB/T41895-2022细胞中DNA病毒测定MNP标记法》最新解读;目录;目录;目录;目录;目录;目录;PART;针对当前及未来可能面临的DNA病毒威胁，提供准确、可靠的测定方法。;;明确标准实施的具体步骤和措施，包括人员培训、设备配置、实验室建设等。;PART;MNP标记法概念;利用MNP的磁性特性，通过外加磁场将标记有MNP的病毒颗粒从复杂样品中分离出来。;PART;;;;科学研究;PART;正式发布;过渡期;PART;;起草人;PART;;生物医学、病毒学、分子生物学等领域的实验室。;病毒活性评估;PART;细胞中DNA病毒种类;RNA病毒;;;PART;;样品处理;;应用前景;PART;;;;PART;;MNP标记法;检测结果与解读;PART;;;阴性结果;PART;;将特定的MNP标记与单纯疱疹病毒DNA进行结合。;根据单纯疱疹病毒基因序列设计特异性引物。;;PART;;MNP标记法;测定过程应在生物安全实验室进行，避免交叉污染和假阳性结果。;PART;特异性识别;MNP技术在人类疱疹病毒检测中的应用;PART;根据病毒特性、检测方法及实验数据，科学合理地设定检出限。;通过大量实验数据，验证病毒检测方法的灵敏度和准确性，确定合理的检出限。;样本处理;PART;;MNP标记法;实验所需材料;;PART;实验室用水应符合GB/T6682中三级水的规格，保证水质的纯度。;定期对实验室用水进行质量监测，确保水质稳定并符合相关标准。;准确性影响;;PART;实验室应具备符合要求的设施，包括生物安全柜、离心机、冰箱等，并确保设备正常运行。;个人防护;;PART;实验室内质量控制;外部质控品的使用;;PART;;科学性;为标准的制定和实施提供基础支撑，确保标准的科学性、规范性和可操作性。;PART;提高检测准确性;基于病毒基因序列;采用分子生物学方法，如PCR、测序等，对样本中的病毒进行检测和鉴定。;PART;;;制备步骤一;PART;;原理;样本采集与处理;PART;;病毒基因组特点;PART;;;PART;应选用与目标病毒DNA序列特异性结合的试剂，避免非特异性扩增和假阳性结果。;材料选择原则;PART;;文库构建;PART;MGI（华大智造）试剂盒;利用高通量测序试剂盒对样本进行文库构建和测序，获得大量的MNP标记数据。;试剂盒选择;PART;;;;PART;选取的序列应具有高度特异性，避免与非目标DNA序列发生交叉反应。;参照标准;监控实验过程;PART;PCR扩增仪;PCR扩增仪校准;PART;;;对反应体系进行高温处理，使DNA双链打开，形成单链模板。;扩增曲线分析;PART;根据所需生物安全等级，选择适当级别的生物安全柜（如I级、II级或III级）。;位置选择;生物安全柜的使用;;PART;;;;样品保存与运输;PART;采集对象;;;PART;根据实验需求选择合适的样本类型，如血液、组织、咽拭子等。;根据样本类型和实验需求选择合适的核酸提取试剂盒。;;PART;采集样本;使用特定的酶对DNA病毒模板的末端进行修复，使其具有平末端或粘性末端。;高通量测序;PART;;;PART;;;将预处理后的序列与参考序列进行比对，确定病毒序列的变异情况和相似性。;PART;阈值设定;报告样品荧光强度值，同时注明检测灵敏度和线性范围。;PART;包括样本中其他微生物、细胞碎片等对检测结果产生的干扰。;;优化样本处理;PART;;;PART;;;MNP标记;;PART;最低数据量;;;PART;实验条件控制不当;;加强实验室生物安全管理，确保实验人员、样本和试剂的安全，防止病毒泄漏和感染。;PART;根据功能将实验室分为清洁区、污染区，有效隔离不同区域。;;;PART;实验室级别;;试剂与耗材;;PART;特异性识别;实验步骤简化;;;PART;;在PCR扩增过程中，利用荧光染料实时监测扩增产物数量，计算病毒DNA含量。;;;PART;增强国际竞争力;;前景展望;THANKS