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F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机理初步研究的开题报告.pdf

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F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机理初步研

究的开题报告

题目:F10基因沉默对KLE细胞凋亡的影响及机理初步研究

一、研究背景和意义:

子宫内膜癌(endometrialcarcinoma,EC)是妇科常见恶性肿瘤,

发病率与其他妇科肿瘤相比呈上升趋势。分子生物学研究表明,F10

(Factorten)可能参与了EC的发生、发展等关键环节。F10是凝血血

管紧张素(Coagulationfactorten)的基因,是血液凝块形成和止血作用

的重要物质。以往研究鲜有报道海绵的F10在细胞生长、凋亡的调控中

的作用。因此,本研究从基因沉默的角度出发,研究F10基因在EC中的

表达及其对细胞生长和凋亡的影响,以期为EC的治疗提供新的治疗靶点。

二、研究内容、方法和步骤:

本研究计划采用基因沉默的方式,通过利用siRNA干扰技术沉默

F10基因,然后研究沉默F10基因对于KLE细胞生长和凋亡的影响以及

可能的作用机制。

步骤如下:

1.设计适合KLE细胞的F10siRNA并进行验证。

2.将沉默F10基因的KLE细胞和野生型KLE细胞分别培养。

3.细胞生长曲线检测,同时采用MTT法检测细胞增殖能力。

4.细胞凋亡检测,包括在细胞中使用propidiumiodide(PI)染色法检

测DNA的断裂、AnnexinV-FITC/PI双染矩形筛选细胞凋亡数量等。

5.Westernblot检测相关凋亡和生存信号通路标志蛋白的表达变化,

包括PARP,CleavedCaspase-3,Bax,Bcl-2等。

三、预期结果及意义:

1.验证F10在EC中的表达并初步研究其对细胞凋亡的影响。

2.将提供一个全新的治疗靶点——F10基因,丰富EC治疗手段。

3.通过明确作用机制,进一步阐述F10受Caspase家族编码基因调

控的凋亡通路。

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