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目录
:1
:.1
引言:2
1禽传染性支气管炎2
1.1鸡传染性支气管炎概述2
1.2传染性支气管炎流行病学2
1.2.1易感动物2
1.2.2途径2
2禽传染性支气管炎概述3
2.1分类地位3
2.2形态特征3
2.3的理化性质3
2.4的生物学活性3
2.5组结构3
2.6的结构蛋白及功能3
2.7N蛋白的研究现状4
3实验材料5
3.1主要试剂5
3.2主要仪器5
3.3其他6
4试验内容与方法6
4.1HQ毒株P10和P110N的克隆与序列测定分析6
4.11RNA提取6
4.1.2引物设计与合成7
4.1.3反转录反应(ReverseTranscription)7
4.1.4PCR反应、鉴定8
4.1.5PCR产物纯化8
4.1.6pGEM-TEasy载体与纯化PCR产物的连接9
4.1.7连接产物的转化9
4.1.8重组质粒提取10
4.1.9重组质粒的PCR鉴定10
4.1.10HQ毒株P10与P110N序列测定与分析比较10
5试验结果11
5.1HQ毒株P10和P110N的克隆与序列测定分析11
5.1.1NRT-PCR扩增结果11
5.1.2重组质粒提取结果11
5.1.3重组质粒PCR鉴定12
5.1.4HQ毒株P10与P110N序列测定与分析13
6讨论14
7结论15
参考文献15
致谢17
:使用SPF鸡胚将HQ毒株连续传代致弱,至110代。对P10和P110的N进行
序列测定分析比较,N在294位、355位、634位、860位和1202位发生改变,并导
致有4个氨基酸残基发生突变。预测N蛋白的潜在磷酸化位点,发现传代前后N蛋白潜
在磷酸化位点的数量和位置都没有变化。本研究为HQ毒株传代前后N
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