蚕豆微核实验.docVIP

方便面调料对蚕豆根尖细胞的遗传毒性研究

姓名：周敏同组者：白霞、闫媛媛、郭凯红、胡雅琦、孔丽娜

〔生物系生物科学102班学号2010131234指导老师:郝雪峰〕

摘要运用蚕豆根尖细胞微核技术，以微核千分率和污染指数作为指标，研究豫竹方便面调料的水溶液对蚕豆根尖细胞的遗传毒性效应。豫竹方便面调料水溶液对蚕豆根尖进行污染处理后，通过观察微核的形态，记录微核的数目，测定蚕豆根尖细胞的微核率，并且在实验中以未经污染处理的蚕豆根尖作为对照，来比拟测定该方便面调料的毒性.该方便面调料的水溶液具有轻度伤害，利用蚕豆根尖微核技术对其污染效应进行监测和评价既简便又比拟可靠。

GenotoxiceffectsofaqueoussolutionofViciafabaroottipcellsusingViciafabaroottipcellswithmicronucleus,themicronucleusrateandthepollutionindexasanindicatorofHenanbambooinstantnoodles.OnViciafaba,pollutiontreatment,Henanbambooinstantnoodlessolutiontoobservetheformofmicronuclei,thenumberofrecordedmicronucleimeasuredmicronucleusrateofViciafabaroottipcellsofViciafabaroottipandintheexperimentwithoutpollutiontreatmentasacontrol,tocomparethedeterminationofthetoxicityoftheinstantnoodles.aqueoussolutionoftheinstantnoodleswithamildinjury,theuseofmicronucleustheirpollutioneffectsmonitoringandevaluationofbothsimpleandrelativelyreliable.

关键词蚕豆微核实验豫竹方便面调料核变异

引言微核〔Nicronucleus，MCN〕是真核生物细胞中的一种异常结构，它是由于细胞受到损伤后，由细胞分裂过程中丧失着丝粒的染色体断片或落后染色体产生的。这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后，在分裂末期不能进入主核，便形成了主核之外的核块。蚕豆根尖细胞微核技术已开展的相当成熟，具有较高的灵敏性和可能性，作为检测化学品遗传毒性的方法，得到了广泛应用[1-2]。而且在测定监测淡水污染物和检测化学诱变剂的研究已列入国家生物监测技术标准〔水环境局部〕，并推广应用于大气、废水、土壤等的致突变活性检测[3]。

但目前关于检测食物的诱变活性报道较少。方便面作为一种速食小吃早已被人们接受，但其调料中的一些成分会在食用过程中渗透到血液中，导致人体细胞的染色体畸变。此外，含调料的废水排出后，会造成水环境方面的污染。因此，本文以蚕豆根尖作为实验材料，来探讨调料的遗传毒性，旨在为其存在的隐患提供一个参考依据。

1、材料与用品

1.1实验材料：蚕豆

1.2实验器材和试剂

显微镜、试管、蚕豆培养盆、纱布、毛巾、三角瓶、载玻片、盖玻片、溶有豫竹方便面调料的水、卡诺氏固定液〔用乙醇和冰醋酸以3:1〔v/v)混合配制〕、盐酸〔1mol/L〕;Giemsa染液

2、实验方法

2.1浸种

按实验需要选取大小均匀、饱满的蚕豆种子30粒，直接放入盛水的塑料盆中，在常温下浸泡1天，期间要注意换水。

2.2催芽

待种子吸胀后，用潮湿的纱布松散包裹置于盆中，纱布上载盖一层湿水的毛巾，催芽约1—2天。

2.3处理根尖

选取初生根生长良好的种子，放入盛有被测液的纱布中，进行根尖处理。另一些继续清水培养〔作为对照组〕。

2.4根尖细胞恢复培养

处理后的种子用自来水浸洗，洗净后再置入潮湿纱布中，再恢复培养一天左右。

2.5取材、制片

固定

将恢复后的种子，从根尖顶端切下1cm长的幼根，用甲醇：冰醋酸〔3：1〕液固定24小时。

解离

用蒸馏水浸洗固定好的幼根，吸净蒸馏水，参加6mol/L盐酸将幼根浸没，室温下酸解10分钟，幼根软化即可。

染色

吸去盐酸，用蒸馏水浸洗幼