血液学检验技术 课件 21.项目二十一：抗凝物质及检验.pptx

单元四：血栓与止血检验及其应用

项目二十一：抗凝物质及检验

一、抗凝物质及其作用

目录

项目二十一：抗凝物质及检验

二、抗凝物质检测

1.掌握：常用抗凝物质检验（复钙交叉试验、凝血酶时间及纠正试验）原理、注意事项及临床意义。

2.熟悉：主要抗凝物质的作用原理。

3.了解：抗凝物质的基本理论。

4.具备常用抗凝物质的检测能力。

5.学会分析抗凝物质检验结果。

学习目标

项目二十一：抗凝物质及检验

项目二十一抗凝物质及检验

一、抗凝物质及其作用

（一）抗凝血酶

抗凝血酶（antithrombin，AT）是一种单链糖蛋白，由肝、血管内皮细胞和巨核细胞合成，属于α2球蛋白。

AT作用：AT是肝素依赖的丝氨酸蛋白酶抑制物，抑酶谱很广，能抑制FⅡa、FVⅡa、FIXa、Fxa、FXⅡa以及纤溶酶、胰蛋白酶和激肽释放酶等，作用机制相同。

AT作用机制：肝素与AT结合后，导致AT构型发生改变，后者可与这些酶活性中心的丝氨酸残基结合，“封闭”了这些酶的活性中心而使之失活。此时肝素可从复合物中重新释出，再与其他游离的AT结合，继续发挥肝素增强AT抗凝功能的作用。

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一、抗凝物质及其作用

（二）蛋白C抗凝系统

蛋白C、蛋白S、APCI由肝脏产生，TM和EPCR由内皮细胞产生和表达。

蛋白C系统

凝血酶调节蛋白（thrombomodulin,TM）

蛋白C（proteinC,PC）

活性蛋白C抑制物

（activatedproteinCinhibitor,APCI）

蛋白S（proteinS,PS）

内皮细胞蛋白C受体

（endothelialproteinCreceptor,EPCR）

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一、抗凝物质及其作用

（二）蛋白C抗凝系统

APC作用机制：蛋白C被凝血酶与凝血酶调节蛋白复合物激活形成活化的蛋白C（APC），这一过程在EPCR辅助下完成。APC在蛋白S的协同下，发挥抗凝作用，主要表现在裂解因子Va、Ⅷa，抑制因子Xa与血小板膜磷脂的结合。

APCI作用机制：APCI通过和APC结合使之失去灭活因子Va、Ⅷa的作用。如果蛋白C或蛋白S有缺陷，与AT缺陷一样（它们均有遗传性缺陷），可引起机体凝血和抗凝平衡失调，导致血栓形成。

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一、抗凝物质及其作用

（三）其他抗凝物质

1.组织因子途径抑制物

组织因子途径抑制物（tissuefactorpathwayinhibitor,TFPI）是一种单链糖蛋白，主要由血管内皮细胞、血小板、单核细胞等合成和分泌。

TFPI在血浆中以与脂蛋白结合和游离两种形在存在。

TFPI作用机制：TFPI存在于Ⅶa和Ⅹa的结合部位，通过和TF-Ⅶa复合物结合抑制其活性，从而对组织因子凝血途径发挥重要调控作用。

项目二十一抗凝物质及检验

一、抗凝物质及其作用

（三）其他抗凝物质

2.抗凝物质

生理性抗凝物质

a2-巨球蛋白

（a2-macroglobulin,a2-MG）

肝素辅因子Ⅱ

（hepauinco-factorⅡ，HCⅡ）

a1-抗胰蛋白酶

（a1-antit-rypsin,a1-AT）

项目二十一抗凝物质及检验

一、抗凝物质及其作用

（三）其他抗凝物质

2.抗凝物质

病理性抗凝物质

狼疮抗凝物

（lupusanticoagulation,LAC）

肝素及类肝素物质

凝血因子抑制物

项目二十一抗凝物质及检验

二、抗凝物质检测

（一）抗凝血酶活性及抗原测定

【实验原理】

1.血浆抗凝血酶活性（antithrombinactivity，AT：A）检测受检血浆中加入过量肝素和FⅩa，使AT与FⅩa形成复合物，剩余的FⅩa水解发色底物，释放发色基团，颜色的深浅与剩余FⅩa的量呈正相关，与血浆中AT：A呈负相关。

2.血浆抗凝血酶抗原（antithrombinantigen，AT:Ag）检测用酶联免疫吸附法或免疫火箭电泳法检测。以抗凝血酶的抗血清制备琼脂糖凝胶板，加入受检血浆电泳，抗原和抗体作用形成火箭样沉淀峰，其高度与血浆中AT的含量呈正相关。

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二、抗凝物质检测

（一）抗凝血酶活性及抗原测定

【参考区间】

血浆AT：A108.5%±5.3%；

血浆AT：Ag（0.29±0.06）g/L。

项目二十一抗凝物质及检验

二、抗凝物质检测

（一）抗凝血酶活性及抗原测定

【临床意义】

AT抗原和AT活性以同时测定为好。两者临床意义相似，但不一定平行，尤其在先天性AT缺陷时，并非AT合成量的减少，而是合成了结构异常的AT分子，测其抗原量正常，而活性减低。

1．AT抗原水平减低见于