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第２３卷第２期武汉大学学报（医学Ｉ｝匣）Ｖｏｌ２３．０２
２００２年４月ＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＷｕｔ￣ｌＵｎｉ￣，ｅｒｓＪｔｙＡｐｒ，２００２
ＭＴＳ１基因突变在原发性膀胱移行细胞癌中的作用
杨志伟郑新民胡礼泉李世文
武汉大学中南医院泌尿外科，武汉４３００７１
摘要目的：探讨ＭＴＳＩ基因在原发性膀胱移行细胞癌（ＴＣＣ）中的作用方法：应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法对３８洌膀
胱移行细胞癌标本ｐｌ６基因的蚺失进行分析结果：３８删膀胱ＴＣＣｓ标本３Ｊ侧有扩增产物、未观察到突蛮突变率
明显低于培养的膀胱癌细胞系。结论：肿瘤细胞自原体转人培养环境的适应阶段ＭＴＳＩ基因突变可能有于肿瘤
细胞的增殖，在膀胱肿瘤细胞传代中起到重要作用，但ＭＴＳＩ基因突变在膀胱ＴＣＣ的发生、发展中可能不起重耍作
用。
关键词膀胱肿瘤；基因；ｐ１６；突变
中图分类号Ｒ７３７．１４
为探讨￣ＩｆＴＳＩ基因突变在膀胱移行细胞癌在ＧｅｎｅＡｍｐＰＣＲｓｙｓｔｅｍ２４００仪（美国Ｐｅｔ￣ｚｉｎ．Ｅｈｎｅｒ公
（ＴＣＣ）发生、发展中的作用，笔者采用ＰＣＲ和ＰＣＲ—司）上扩增扩增条件：９５预变性５ｍｉｎ，５５加
ＳＳＣＰ方法对人原发性膀胱移行细胞癌标本ｐ１６基因ＴａｑＤＮＡ多聚酶１．２５Ｕ，接着９４，６０Ｓ；４８及５５
缺失进行研究。℃，６０ｓ：７２。６０ｓ；３５个循环，最后７：延伸５
ｍｉｎ。扩增产物在２．０％琼脂糖凝胶电泳紫外灯下观
１材料与方法
察扩增效果。
１．１标本来源３８例病理检查证实的原发性膀胱１．３ｓｓｃＰ分析取上述电泳证实的ＰＣＲ扩增产物
Ｔｃｃｓ和９例正常膀胱粘膜标本来源于武汉大学中南１０，ｌ，加入甲酰胺变性液２ＯＪｄ，９５℃热变性５ｍｉｎ
医院泌尿外科近两年手术。一７Ｏ℃冰箱速冻保存。后冰乙醇聚冷，上样于含５％甘油的８％聚丙烯酰胺
以供提取ＤＮＡ。凝胶，在１５０Ｖ电压下电泳４～６ｈ，完毕后在０．５Ｊ
１．２ＤＮＡ提取及ＰＣＲ方法建立组织ＤＮＡ提取依ｍＩ溴化乙锭中染色３Ｏｍｉｎ，紫外灯下观察突变情况。
常规方法进行。正常膀肮粘膜ＤＮＡ作对照，３磷酸
２结果
甘油醛脱氢酶（ＧＡＰＤＨ）基因作内对照（图１），扩增
ＭＴＳＩ基因两个外元，即外元１和外元２。引物设计正常膀胱粘膜均有扩增产物，３８例膀胱ＴＣＣｓ组
见表１。反应体系５Ｏｆ』ｌ，模板ＤＮＡ０．２ｆ咏，ＭｇＣｌ２１．５织中，３１例有扩增产物。正常膀肮粘膜和３ｉ例有扩
ｍｍｏｌ／Ｌ。ＫＣＩ５０ｒｅｏｔｏｌ／Ｌ，Ｔｒｉｓ・ＣＩ１０ｍｍｏｌ／Ｌ，ｄＮＴＰ０．２增产物的膀肮ＴＣＣｓ组织ＳＳＣＰ分析均未观察到
ｎ￣ｎｏｌ／Ｌ，每对引物各２０ｐｍｏＵＬ，混匀后液体石蜡覆盖ＭＴＳ１基因突变。
表ＭＴＳＩ基１园及Ｇ：ＬＰＤｔｔ基园引物序列
作者简介：杨志伟．，１９６３一．博士，主任医师，主要从事膀胱帅榴研究
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