MiR-145-5p对胶原诱导的关节炎小鼠关节炎症的影响 .pdfVIP

MiR-145-5p对胶原诱导的关节炎小鼠关节炎症的影响

明建松;王晓雪;杨梦晨;汤可;袁玉华

【摘要】目的:探讨miR-145-5p对胶原诱导的关节炎(CIA)小鼠关节变化的影响.

方法:采用牛Ⅱ型胶原免疫DBA/1小鼠诱导CIA,对关节指数评分及足跖肿胀程度

进行比较,成模后随机分为agomiR-145-5p组和agomiR空载体(agomiR-NC)组

进行干扰,采用足爪micro-CT摄片,踝关节病理检查评分及石蜡切片、HE染色进行

处理,并通过免疫组化方法(IHC)检测踝关节中金属蛋白酶-1(MMP-1)、金属蛋白

酶-3(MMP-3)、金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素

17(IL-17)和金属蛋白酶17(ADAM17)的表达.结果:成功建立CIA小鼠模型,与

agomiR-NC组相比,agomiR-145-5p组micro-CT分析显示骨侵蚀更严重,组织

病理学显示滑膜炎症减轻,免疫组化结果显示MMP-3、MMP-9、MMP-13和IL-

17水平升高,MMP-1水平无差异,ADAM17水平降低(P＜0.05).结论:成功建立CIA

小鼠模型,并发现miR-145-5p加重关节破坏的同时部分抑制了CIA小鼠的关节炎

症.

【期刊名称】《天津医科大学学报》

【年(卷),期】2019(025)002

【总页数】4页(P115-118)

【关键词】类风湿关节炎;microRNA;胶原诱导关节炎模型

【作者】明建松;王晓雪;杨梦晨;汤可;袁玉华

【作者单位】天津医科大学总医院检验科,天津300052;天津港口医院检验科,天津

300456;天津医科大学总医院检验科,天津300052;天津医科大学总医院检验科,天

津300052;天津医科大学总医院检验科,天津300052;天津医科大学总医院检验科,

天津300052

【正文语种】中文

【中图分类】R684.3

类风湿关节炎（rheumatoidarthritis，RA）是一种常见的慢性并累及多个关节的

自身免疫性疾病，它的发病机理是一种涉及到多种细胞、细胞因子和免疫活性物质

的复杂过程，其发病机制尚不完全清楚。近几年发现microRNA参与免疫应答反

应，可能在RA的疾病进展中发挥重要作用。前期实验发现，miR-145-5p在RA

中与对照组骨关节炎（OA）滑膜组织和滑膜细胞相比，在RA外周血单个核细胞

（PBMC）、滑膜组织和成纤维细胞样滑膜细胞（FLS）中miR-145-5p水平显著

增加[1]。通过调节ADAM17的表达，miR-145-5p调节RA-FLS的增殖、细胞周

期进程和炎性细胞因子的表达；通过下调Ets-1，miR-145-5p模拟上调IL-17水

平和基质金属蛋白酶MMP-3，MMP-9和MMP-13的表达。现结合胶原诱导的

关节炎CIA小鼠模型，增强miR-145-5p表达，观察CIA小鼠关节变化情况，分

析miR-145-5p在CIA中的作用。

1材料和方法

1.1材料DBA/1小鼠36只，雄性，8周龄左右，SPF（SpeceficPathogenFree，

无特定病原体）级，体质量（20±2）g，由北京华阜康公司提供，标准饲料喂养，

自由饮水、饮食，适应性饲养7d，进行实验。动物于天津医科大学总医院饲养。

本研究经天津医科大学动物护理与使用委员会批准。

1.2试剂牛Ⅱ型胶原（液）及弗氏完全佐剂购于美国chondrex公司，agomiR-

145-5p购于中国广东Ribobio公司，小鼠麻醉剂水合氯醛购于美国sigma公司。

将冻干的牛II型胶原蛋白在4℃下在0.05mol/L乙酸中过夜溶解，在弗氏完全佐

剂中乳化至最终浓度为2mg/mL。

1.3CIA小鼠模型建立取36只8周龄，雄性DBA/1小鼠，适应性饲养2～3d之

后，随机分组选