结直肠癌组织中EphB4受体表达及临床意义 .pdfVIP

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山东医药２００７年第４７卷第２６期

结直肠癌组织中ＥｐｈＢ４受体表达

及临床意义

夏晓天，邹扬，汪昱

（上海交通大学附属第六人民医院，上海２００２３３）

［摘要】应用组织芯片技术结合免疫组织化学法检测２１０例结直肠癌组织标本、１６３例癌旁正常组织中

ＥｐｈＢ４受体的表达情况，结果ＥｐｈＢ４受体在结直肠癌组织和正常结直肠组织中均有表达，癌组织平均表达强度低

于正常组织；ＥｐｈＢ４受体的表达与结直肠癌组织分化、Ｄｕｋｅｓ分期、淋巴结转移无明显相关性。认为结直肠癌组织

及正常组织中均存在ＥｐｈＢ４受体，但癌组织中表达降低；其与临床病理因素无明显相关性。

［关键词】ＥｐｈＢ４受体；肠肿瘤，结直肠癌

［中图分类号］Ｒ７３５．３［文献标示码］Ｂ［文章编号］１００２—２６６Ｘ（２００７）２６－００７９－０２

２００４～２００５年，我们采用组织芯片技术结合免公司）；ＤＡＢ：ＬｉｑｕｉｄＤＡＢＳｕｂｓ￣ａｔｅＣｈｒｏｍｏｇｅｎＳｙｓｔｅｍ

疫组织化学方法检测了２１０例结直肠癌患者癌组织（丹麦Ｄａｋｏ公司）。

中ＥｐｈＢ４受体表达情况，旨在探讨ＥｐｈＢ４受体的表２方法

达及其与各临床病理因素的关系。２．ＥｐｈＢ４检测１对标本行常规Ｓ－Ｐ法（二步法）

１材料免疫组化染色，严格按照试剂操作说明进行。芯片

１．１标本收集和组织芯片构建收集我院２００４～脱蜡水化；ＰＢＳ洗３次，各６ｍｉｎ，抗原修复（高压热

２００５年２２５例结直肠癌患者手术切除标本，患者术修复法）；将芯片周围擦干，滴加３％的ＨＯ一甲醇，

前均未行放、化疗；取１６３例患者的癌旁正常组织。室温孵育１０ｍｉｎ；ＰＢＳ洗３次，各６ｍｉｎ；将芯片周围

对每一供体蜡行切片和Ｈ—Ｅ染色。显微镜下对所擦干，滴加非免疫山羊血清，室温孵育２０ｍｉｎ；芯片

需穿取目标组织定位，选取癌组织、癌旁正常组织甩干，滴加一抗１００ｘＩｌ，４℃孵育过夜；过夜后，待芯

（共计个位点癌组织２１０个、癌旁正常组织１６３个）。片恢复至室温；ＰＢＳＴ洗４次，各８ｍｉｎ；芯片甩于，滴

利用组织芯片制作仪（ＢｅｅｃｈｅｒＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ公司）依加二抗１００，室温孵育３０ｍｉｎ；ＰＢＳＴ洗４次，各８

次从供体蜡块上穿取直径为１．０ｍｌ＂ｆｌ的组织芯（每ｍｉｎ；芯片甩于，滴加ＤＡＢ显色液１００ｘＩｌ，室温孵育

块组织取两个组织芯）插入有２４８点阵的受体蜡块１０ａｒｉｎ；流水冲洗芯片１５ｍｉｎ；苏木素复染，脱水，封

中，以４ｍ的厚度连续切片。所得组织芯片每点都片。在低倍镜（×１００）下寻找肿瘤区域，以细胞质出

经过病理诊断。由于不符合组织芯片的要求，ｌ５例现棕黄色作为阳性细胞，在正常组织切片中按同样

标本被剔除。共收集结直肠癌标本２１０例，癌旁正标准寻找含有棕黄色染色的阳性组织细胞。更换倍

常组织１６３例。患者中男１１５例，女９５例；年龄３２数为１×２００。ＥｐｈＢ４阳性细胞染色主要在细胞膜和

８７岁，平均６４．７岁。Ｄｕｋｅｓ分期为Ａ期１８例，Ｂ细胞质。每个组织核心按染色强度再分阴性０、弱

～

期９５例，Ｃ期６９例，Ｄ期２８例。有淋巴结转移９３１、中度２、强３。两个组织核心的得分取平均值，均

例，无淋巴转移１１７例。中高分化１７９例，低分化３１分＜１为阴性，≥１为阳