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CD59基因W40位点突变、真核表达与生物学活性研究的
开题报告
研究背景：
CD59是一种细胞表面膜蛋白，其主要功能是抑制补体系统，从而避免补体系统
过度激活引起的自身免疫性疾病。在正常情况下，CD59能够调控补体活性，维持细胞
的稳态。然而，CD59基因发生突变或缺失将导致补体系统过度活化，导致自身免疫性
疾病。
近年来的研究表明，CD59基因的突变与自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮、类
风湿性关节炎等疾病有关。因此，对CD59基因的研究非常重要，可以帮助我们更好
地了解该基因的功能和调控机制，为自身免疫性疾病的预防和治疗提供新思路。
研究内容：
本研究将着重探讨CD59基因W40位点的突变对其真核表达和生物学活性的影
响。具体内容如下：
1.对CD59基因W40位点进行突变：采用CRISPR/Cas9技术对CD59基因的
W40位点进行突变，构建W40A突变体和W40K突变体。
2.构建真核表达载体：将CD59基因的W40A突变体和W40K突变体插入真核表
达载体pCMV14进行构建。
3.转染细胞：利用Lipofectamine3000将构建完成的真核表达载体转染到293T
细胞中，分别观察W40A和W40K突变体的真核表达情况。
4.检测细胞表面CD59含量：采用流式细胞术检测转染后293T细胞表面CD59
含量的变化。
5.检测细胞膜完整性：利用荧光染料Propidiumiodide（PI）染色检测转染后
293T细胞膜完整性的变化。
研究意义：
通过本研究，我们可以更深入地了解CD59基因的调控机制和突变对其生物学活
性的影响。同时，对于CD59基因与自身免疫性疾病之间的关系也将提供一定的理论
支持。此外，本研究的结果还有助于为自身免疫性疾病的预防和治疗提供新的思路和
方法。
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