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川楝素对TRAIL抗肝癌活性及其机制研究

史杰;王芳

【摘要】目的观察川楝素对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)抗肝癌活性影

响并研究其机制.方法将HepG2人肝癌细胞分为对照组、川楝素组、TRAIL组、

川楝素+TRAIL组及川楝素+TRAIL+DR5小干扰RNA(DR5siRNA)组,CCK-8法

检测HepG2细胞活力,流式细胞术检测HepG2细胞的凋亡和线粒体膜电

位,Westernblot实验和流式细胞术检测HepG2细胞表面DR5表达水平及

Caspase-8、Caspase-3活化水平.结果TRAIL+川楝素组HepG2相对细胞活力

(0.42±0.04),显著低于TRAIL单治疗组(0.84±0.07,P＜0.05)和川楝素

+TRAIL+DR5siRNA组(0.76±0.06,P＜0.05).TRAIL+川楝素组HepG2细胞凋亡

率(32.7±2.4)％,显著高于TRAIL单治疗组[(9.3±0.9)％,P＜0.05]和川楝素

+TRAIL+DR5siRNA组[(13.8±1.1)％,P＜0.05].川楝素处理对HepG2细胞Bcl-2

家族蛋白的表达无明显影响,但能显著提高HepG2细胞表面DR5表达水

平.TRAIL+川楝素组HepG2细胞的相对线粒体膜电位(0.26±0.02),显著低于

TRAIL单治疗组(0.78±0.06,P＜0.05)和川楝素+TRAIL+DR5siRNA组

(0.68±0.05,P＜0.05).TRAIL+川楝素组HepG2细胞Caspase-8表达水平

(0.37±0.04),显著高于TRAIL单治疗组(0.11±0.04,P＜0.05)及川楝素

+TRAIL+DR5siRNA组(0.14±0.02,P＜0.05);TRAIL+川楝素组HepG2细胞

Caspase-3表达水平(0.42±0.04),显著高于TRAIL单治疗组(0.13±0.02,P＜0.05)

及川楝素+TRAIL+DR5siRNA组(0.17±0.02,P＜0.05).结论川楝素可上调肝癌细

胞死亡受体5(DR5)表达,提高TRAIL抗肿瘤活性.

【期刊名称】《浙江中西医结合杂志》

【年(卷),期】2017(027)011

【总页数】5页(P936-939,946)

【关键词】肝细胞肝癌;川楝素;DR5;TRAIL

【作者】史杰;王芳

【作者单位】浙江省慈溪市人民医院检验科宁波315300;浙江医院检验科杭州

310007

【正文语种】中文

肝癌是预后很差的恶性肿瘤，致死率非常高[1]。尽管手术治疗是目前治疗肝癌最

为有效的手段，然而对于中晚期不能进行手术的患者，化疗或免疫治疗是不可替代

的治疗手段[2]。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF-relatedapoptosis-

inducingligand，TRAIL）属于肿瘤坏死因子超家族成员。研究[3]表明，TRAIL

能诱导肿瘤细胞发生凋亡而对正常细胞的功能无明显影响，因此TRAIL是一种非

常有临床应用前景的肿瘤治疗药物。然而某些类型的肿瘤细胞，如肝细胞肝癌细胞

对TRAIL治疗的敏感性较低[4]，因此辅以其它药物提高肝癌细胞对TRAIL的敏感

性是提高其疗效的有效方法。本研究的目的在于探讨川楝素对TRAIL抗肝癌活性

的影响并研究其机制。

1.1材料川楝素购于南京春秋生物工程有限公司。人重组TRAIL、细胞计数试剂

盒（cellcountingkit-8，CCK-8）、和凋亡检测试剂盒购于美国Sigma-Aldrich。

DMEM培养基购于美国Gibco。死亡受体5（DR5）、活化半胱天冬酶-8

（cleavedcaspase-8）、活化半胱天冬酶-3（cleavedcaspase-3）和β肌动蛋

白（β-actin）抗体购于美国CellSignaling。DR5-PE流式细胞抗体购于美国

Ramp;Dsystem。