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2024-11-23 发布于湖北
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PCR的种类及应用.ppt

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PCR的种类及应用;;*;*;*;TaqDNA聚合酶是从一种水生栖热菌(Thermusaquaticus)yT1株别离提取的.yT是一种嗜热真菌，能在70-75℃生长.存在于水生嗜热菌(Thermusaquaticus)的嗜热DNA聚合酶，可在74℃复制DNA，在95℃仍具有酶活力。该酶可在离体条件下，以DNA为模板，延伸引物，合成双链DNA。这个酶只有5′→3′DNA聚合酶活性和5′→3′的外切酶活性，缺少3′→5′的外切酶活性。;*;PCR操作过程;引物设计;PCR的各种变体;;1.用一种在靶序列上没有切点的限制性内切酶消化大分子量的DNA

2.产生的大小不同的线性DNA片段群体，其中具靶DNA区段的DNA分子长度不超过2-3Kb,经连接后环化成环状分子;应用：;;根本原理：;;;;荧光定量PCR(Q-PCR);;;分子信标〔molecularbeacon〕是一种呈发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针，两端的核酸序列互补配对，因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。;Q-PCR的应用;RT-PCR;巢式PCR;;TouchdownPCR;*;*;*;谢谢