DB15T 3717—2024枣组织培养育苗技术规程.docx

ICS65.020.20CCSB61

15

内蒙古自治区地方标准

DB15/T3717—2024

枣组织培养育苗技术规程

Codeofpracticeforseedlingcultivationbytissueculturein

ziziphusjujuba

2024-11-15发布2024-12-15实施

内蒙古自治区市场监督管理局发布

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由内蒙古自治区林业和草原局提出并归口。

本文件起草单位：内蒙古农业大学、内蒙古蒙枣科技有限公司。

本文件主要起草人：白玉娥、张胜利、格根珠拉、李孔、代金玲、包文泉、阿日查、代来宝、佟永俊、金牧兰。

枣组织培养育苗技术规程

1范围

本文件规定了枣组织培养育苗的培养条件、培养基制备、外植体处理、组织培养、炼苗移栽、苗期管理等技术。

本文件适用于枣组培苗的规范化生产。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

LY/T1882林木组织培养育苗技术规程

3术语和定义

LY/T1882界定的术语和定义适用于本文件。

4培养条件

培养条件如下：

——组培室建设、组培流程、管理按照LY/T1882执行；——初代培养和继代培养为暗培养；

——分化培养和生根培养光照强度1500Lx～2000Lx，光照时间12h/d～14h/d；

——初代培养、继代培养、分化培养、生根培养温度为24℃~26℃,湿度为50%～80%。

5培养基制备

5.1培养基母液配置与保存

5.1.1药品与母液保存

培养基制备中使用的化学药品均为分析纯。各成分称取量按照附录A。配制后母液4℃保存，3个月之内使用，如出现沉淀，弃用。

5.1.2大量元素母液配制

称量CaCl2·2H2O置于500mL烧杯中，加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000mL容量瓶中，加蒸馏水定容，贴上标签，注明化合物名称，浓缩倍数，配制日期和配制者姓名。称量除CaCl2·2H2O以外的其余大量元素化学试剂，混合在500mL烧杯中，加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000mL容量瓶中，加蒸馏水定容，贴上标签。

7组织培养

5.1.3铁盐母液配制

将FeSO4·7H2O和Na2EDTA分别溶于450mL蒸馏水中，加热，不断搅拌，溶解后，两液混合，加水定容至1000mL，冷却后置于棕色瓶中，贴上标签。

5.1.4微量元素母液的配制

顺次溶解各成分后再混匀，定容在1000mL容量瓶中，贴上标签。

5.1.5有机成分母液配制

各成分分别称量后，溶解，定容在500mL容量瓶中，贴上标签。

5.1.6生长调节剂母液配制

称取50mg生长调节剂。溶解后，在100mL的容量瓶中定容，生长调节剂母液浓度0.5mg/mL。2,4-D、吲哚丁酸（IBA）先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。6-苄基嘌呤（6-BA）、噻苯隆(TDZ)先溶于少量的1moL/L的HCl溶液或NaOH溶液。

5.2培养基制备

5.2.1制备培养基

配制1L培养基，烧杯中先加蒸馏水700mL，再加入琼脂，加热搅拌。琼脂融化后，加入蔗糖，搅拌溶解。依次量取大量元素母液、铁盐母液、微量元素母液、有机成分母液。各母液取用量按照附录A。搅拌均匀。根据初代培养、继代培养、分化培养、生根培养的要求加入相应种类和用量的生长调节剂。搅拌后加蒸馏水定容至1L。用1mol/LNaOH或1moL/LHCl溶液来调节pH值至6.1，pH值测定使用pH计或pH试纸。

5.2.2分装培养基

把制备好的培养基分装到培养瓶中，盖紧瓶盖。分装时勿将培养基沾在培养瓶瓶口。高温高压灭菌，压力为102.9kPa，温度为121℃,灭菌时间为15min～20min。培养基灭菌后冷却凝固后放入超净工作台备用。贮存时间不应超过7d。

6外植体采集及处理

6.1外植体采集

外植体为幼嫩叶片。选择无病虫害、生长健壮的枣树，4～6月取当年生未木质化枣头枝顶端萌发