病毒PPT课件课件.ppt

一、病毒的复制周期（replicativecircle）自病毒吸附于细胞开始，到子代病毒从感染细胞释放到细胞外的过程，称病毒的复制周期或复制循环。一般分为5个阶段：①吸附；②侵入与脱壳；③病毒大分子的合成，包括病毒基因组的表达与复制；④装配；⑤释放；第31页,共58页，星期六，2024年，5月病毒吸附蛋白（viralattachmentpotein,VAP）:亦称“反受体”能够特异性地识别细胞受体并与之结合的病毒表面的结构蛋白无包膜病毒的VAP往往是衣壳的组成部分，如：T-偶数噬菌体的尾丝蛋白；有包膜病毒的VAP为包膜糖蛋白，如：流感病毒包膜表面的刺突；第32页,共58页，星期六，2024年，5月植物病毒：通过因人为地或自然的机械损伤所形成的微伤口进入细胞；或者靠携带有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器的昆虫取食将病毒带入细胞。植物病毒一旦进入细胞后，增殖产生的子代病毒或病毒核酸可通过病毒编码的运动蛋白（movementprotein）与胞间连丝的相互作用从受染细胞进入邻近细胞。第33页,共58页，星期六，2024年，5月脱壳：脱壳是病毒侵入后，病毒的包膜和/或壳体除去而释放出病毒核酸的过程。脱壳是病毒基因组进行功能表达所必需的感染事件。T-偶数噬菌体脱壳与侵入是一起发生的动物病毒存在不同的结构类型和不同的侵入方式，其脱壳过程也较复杂。病毒的毒粒消失，失去原有的感染性，进入潜隐期。第34页,共58页，星期六，2024年，5月（1）核酸的复制、转录根据病毒核酸的类型、复制、转录方式的不同，可分为6类：第35页,共58页，星期六，2024年，5月4.病毒的装配与释放病毒的释放标志病毒复制周期结束第36页,共58页，星期六，2024年，5月大多数噬菌体都是以裂解细胞方式释放第37页,共58页，星期六，2024年，5月丝杆噬菌体（如M13或fd）不杀死细胞，子代毒粒以分泌方式不断从受染细胞中释放，并同时完成毒粒的组装。第38页,共58页，星期六，2024年，5月有包膜的动物病毒是在从宿主细胞核芽出或细胞质膜芽出的过程中裹上包膜而形成包膜病毒。第39页,共58页，星期六，2024年，5月二、一步生长曲线（onestepgrowthcurve）研究病毒复制的一个实验，定量描述烈性噬菌体生长规律的曲线。反映3个参数：1）潜伏期；2）裂解期；3）裂解量1939年，MaxDelbruckEmoryEllis：E.coli/bacteriopage1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞；2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）；3、将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新释放的噬菌体感染其它细胞；4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体含量进行计数）；5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘制出病毒特征性的繁殖曲线；该实验标志着分子病毒学、分子生物学和分子遗传学的建立MaxDelbruck因此荣获1969年NobelPrize第40页,共58页，星期六，2024年，5月（参见P72）一步生长曲线（onestepgrowthcurve）噬菌体复制（裂解周期）分为三个阶段：1、潜伏期从噬菌体吸附到细胞到释放出新噬菌体的最短时期。1）隐晦期：无成熟的噬菌体粒子。2）胞内积累期。2、裂解期随着宿主细胞迅速裂解，溶液中噬菌体粒子数目急剧增加，直到最高值的一段时间。3、平稳期指感染后的宿主已全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高点后的时期。第41页,共58页，星期六，2024年，5月效价（titre）或噬菌斑形成单位（plaque-formingunit,pfu）每毫升试样中所含有的噬菌体粒子数。（p77）效价的测定方法双层平板法：下层：固体培养基上层：敏感菌+噬菌体+半固体培养基形成噬菌斑（计平板上的噬菌斑数量）p78液体稀释管法：接菌接噬菌体液体培养基：清混清