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分光光度法
一概述
(一)比色分析与分光光度法
1比色分析基于比较有色物质溶液颜色的深浅来确定物质含量的分析方
法.
2分光光度法根据物质溶液对一定波长光的吸收程度来确定物质含量的分
析方法.
可见分光光度法波长范围400-760nm
紫外分光光度法波长范围200-400nm
(二)特点
(1)具有较高的灵敏度，适用于微量组分的测定。
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(2)通常所测试液的浓度下限达10~10mol·L。
(3)吸光光度法测定的相对误差约为2%~5%。
(4)测定迅速，仪器操作简单，价格便宜，应用广泛
(5)几乎所有的无机物质和许多有机物质的微量成分都能用此法进行测定。
(6)还常用于化学平衡等的研究。
二分光光度法的基本原理
(一)电磁辐射的基本性质
1波动性C=λν
2微粒性E=hc/λ
一定波长的光对应一定的能量,即每个光子具有一定的能量.
(二)物质对光的选择吸收
1物质对光的选择性吸收
M+热
M+hM*
M+荧光或磷光
E=E-E=h
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量子化；选择性吸收;
分子结构的复杂性使其对不
同波长光的吸收程度不同；
2分子光谱为带状光谱.
电子能级间跃迁的同时总伴随有振动和转动能级间的跃迁。即电子光谱中总包
含有振动能级和转动能级间跃迁产生的若干谱线而呈现宽谱带。分子光谱为带
状光谱.
3吸收曲线
分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同，用不同波长的单色光照
射，测吸光度—吸收曲线与最大吸收波长max
（1）同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最
λ
大吸收波长max
λ
（2）不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似max不变。而对于不同物
λ
质，它们的吸收曲线形状和max则不同。
（3）吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。
λ
（4）不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度A有差异，在max处吸
光度A的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。
λ
（5）在max处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是
定量分析中选择入射光波长的重要依据。
4可见光与溶液的颜色
(1)单色光与复合光
单色光具有一定波长的光.
复合光具有一定波长范围的光.
(2)互补色光适当颜色的两种单色光按一定比例混合可以得到白光,这两种颜
色的光称为互补色光
表物质颜色与吸收光颜色的互补关系
吸收光
物质颜色
颜色波长/nm
黄绿紫400~450
黄蓝450~480
橙绿蓝480~490
红蓝绿
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