原创力文档- 1、本文档共7页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
破伤风类毒素单克隆抗体的制备及初步鉴定
张秀昌刘芳崔萍孙黎罗强贾天军
【摘要】目的：制备并鉴定破伤风类毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株，
为破伤风的快速检测及致病机制的研究提供实验材料。方式：用破伤
风类毒素做抗原免疫BALB/C小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融
合，取得分泌高滴度针对破伤风类毒素的杂交瘤细胞株，测定单抗免
疫球蛋白亚类及单抗效价，用间接ELISA和Westernblot检测单
克隆细胞株的特异性。结果：通过细胞融合和克隆化，挑选出3株持
续分泌抗破伤风类毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株1E1二、1E1一、
1G10。间接ELISA和Westernblot检测结果说明1E1二、1E1一、
1G10能够和破伤风类毒素发生特异性反映。结论：成功制备了抗破伤
风类毒素单克隆抗体，为制备免疫诊断试剂盒和抗体药物的开发奠定
了基础。
【关键词】破伤风类毒素；杂交瘤；单克隆抗体
【ABSTRACT】Objective:Toestablishandpreparehybridomacell
linesecretingmonoclonalantibody(McAb)againsttetanic
toxoid,todeveloparapidassayforTetanusandinvestigatethe
pathogenesisofthevirus.Methods:BALB/cmousewasimmunized
bypurifiedtetanictoxoid.Hybridomacelllinessecreting
monoclonalantibodies(McAbs)againsttetanictoxoidwere
screenedafterthefusionofmousespleniccellswithSP2/0cells.
TheIgsubtypesandtiteroftheMcAbswereassayedwithELISA
andWesternblotassay.Results:Aftercellfusionand
subcloning,threehybridomacelllinessecretingmonoclonal
antibodiesspecificallyagainsttetanictoxoidwereobtained,
andrespectivelynamedas1E12,1E11and1G10.IndirectELISA
andWesternblotassayshowedthattheMcAbs1E12,1E11and
1G10couldspecificallyrecognizetetanictoxoid.Conclusion:
ThespecificantitetanictoxoidMcAbsaredevelopedandthese
McAbsmaybeusefulinthedevelopmentofdetectionassayand
basicresearchofthepathogenesisofTetanus.
【KEYWORDS】Tetanictoxoid;Hybridomacellline;Monoclonal
natibodies
破伤风梭状杆菌是引发破伤风的病原菌，当机体受到外伤，创口被污
染，或临盆时利用不洁器械剪断脐带等，本菌可侵入局部创面而引发
外源性感染，发芽繁衍，释放毒素,在进展中国家，新生儿破伤风死亡
率可高达90%。目前对破伤风的诊断要紧依照典型的病症和病史。单
克隆抗体用于诊断感染性疾病具有灵敏度高、特异性强的特点，在许
多疾病的诊断中已取得普遍应用。本实验第一次成功制备破伤风类毒
素单克隆抗体，为单抗应用于破伤风的临床诊断奠定了基础。
1资料与方式
1．1试剂、毒素、细胞与实验动物破伤风类毒素由北京生物制品监
定所提供。福氏完全佐剂及福氏不完全佐剂购自北京市普京康生物工
程技术。BALB/C小鼠购自首都医科大学动物室。SP2/0细胞由北京肿
瘤研究所惠赠。聚乙二醇（PEG，MW1000，）为
文档评论（0）