一种破伤风类毒素疫苗的制备方法[发明专利] .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN102961741A

(43)申请公布日2013.03.13

(21)申请号201210533681.9

(22)申请日2012.12.10

(71)申请人武汉生物制品研究所有限责任公司

地址430060湖北省武汉市武昌区临江大道

9号

(72)发明人李佩珊陈亮白磊凌霜

杨以梅杨海燕薛红刚李新国

(74)专利代理机构武汉开元知识产权代理有限

公司42104

代理人樊戎徐绍新

(51)Int.Cl.

A61K39/08(2006.01)

A61P31/04(2006.01)

权利要求书1页说明书4页附图2页

权利要求书1页说明书4页附图2页

(54)发明名称

一种破伤风类毒素疫苗的制备方法

(57)摘要

本发明公开了一种破伤风类毒素疫苗的制备

方法，该方法是以破伤风梭状芽孢杆菌菌株为原

料，经过破伤风类毒素的培养、菌液分离、超滤浓

缩、盐析和超滤脱盐等步骤制备而成的。本发明

先将培养液进行脱毒处理，再进行精制，从而减少

板框过滤除去菌体的过程中菌体和其他杂质碎片

对板框膜包的堆积引起的孔道堵塞，

增加过滤过

程中的流畅性；通过改进盐析方法，有效去除了

培养液中的毒素蛋白和其他致敏原；培养液的浓

缩和盐析后的脱盐方法采用的均是切向流超滤方

法，减少了因对毒素蛋白的剪切造成的抗原破坏，

避免了蛋白的沉淀。本发明缩短了破伤风类毒素

疫苗的制备时间，提高了生产效率。

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权利要求书

CN102961741A1/1页

1.一种破伤风类毒素疫苗的制备方法，其特征在于：将破伤风菌种经传代发酵，甲醛

脱毒后，将培养液调节pH至6.9~7.5，过滤除去菌体，将滤液用孔径为10~40KD的超滤膜进

行超滤，直至滤液的体积为原体积的1/6~1/8，再向滤液中加入质量体积比为20~30%的硫

酸铵盐析，静置24小时后离心分离，将离心后的沉淀用注射用水完全溶解后，再次用孔径

为10~40KD的超滤膜超滤，直至滤液中硫酸铵的质量百分含量小于0.025%。

2.根据权利要求1所述的破伤风类毒素疫苗的制备方法，其特征在于：所述超滤膜的

孔径为30KD。

3.根据权利要求1所述的破伤风类毒素疫苗的制备方法，其特征在于：所述超滤的压

力为10~15psi，流速为200~220L/小时。

4.根据权利要求1所述的破伤风类毒素疫苗的制备方法，其特征在于：向滤液中加入

质量体积比为25~27%的硫酸铵盐析。

5.根据权利要求1所述的破伤风类毒素疫苗的制备方法，其特征在于：所述过滤除去

菌体采用的是板框过滤。

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说明书

CN102961741A1/4页

一种破伤风类毒素疫苗的制备方法

技术领域

[0001]