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细胞自噬在植物应答盐胁迫中的作用研究

朱峰;简伟;邓星光;林宏辉

【摘要】本研究以模式植物拟南芥为材料,利用生理学和遗传学手段分析了盐胁迫

下细胞自噬基因和活性氧(ROS)变化的相关性.结果表明野生型拟南芥Col-0在遭

受盐胁迫处理3d表现了叶片漂白的症状并且会诱导ROS的产生和积累了大量的

细胞死亡.荧光定量PCR实验表明盐胁迫会诱导细胞自噬相关基因的表达,细胞自噬

参与了调控植物的防御机制来响应盐胁迫,进一步的实验表明拟南芥细胞自噬突变

体atg2和atg5在遭受盐胁迫处理3d表现了更加严重的叶片漂白症状并且积累

大量的细胞死亡和ROS.初步表明细胞自噬主要是通过调控ROS的产生来应答盐

胁迫.

【期刊名称】《四川大学学报（自然科学版）》

【年(卷),期】2016(053)006

【总页数】6页(P1403-1408)

【关键词】细胞自噬;活性氧;盐胁迫;拟南芥

【作者】朱峰;简伟;邓星光;林宏辉

【作者单位】四川大学生命科学学院,成都610064;扬州大学园艺与植物保护学院,

扬州225009;四川大学生命科学学院,成都610064;四川大学生命科学学院,成都

610064;四川大学生命科学学院,成都610064

【正文语种】中文

【中图分类】Q945

植物在生长发育过程中经常会遭受到营养缺乏等环境胁迫，细胞内完善的蛋白降解

机制对于维持细胞稳态和应答环境胁迫是必要的.植物体内主要有两条蛋白降解途

径，一条是通过泛素/26S蛋白酶体途径对细胞内一些短周期的、或结构异常的蛋

白进行特异性的降解[1]；另外一条主要是通过细胞自噬途径降解蛋白，它能够对

细胞内长寿命的蛋白或者功能异常的细胞器进行大批量的降解，其降解蛋白的效率

远远高于泛素/蛋白酶体途径.细胞自噬是指细胞分解细胞质等自身构成成分的现象.

首先一些异常蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后送至液泡中进行降解

[2].细胞自噬主要有3种形式，巨自噬(macroautophagy)，微自噬

(microautophagy)，分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediatedautophagy)[3].

细胞自噬在各种生命活动中发挥着重要作用，比如它可以加速细胞内的新陈代谢，

或者在细胞处于饥饿状态时从分解产物中获得能量.在动物研究中，虽然大多数研

究成果证明细胞自噬是细胞生存的负调控因子，但是人们已经开始认识到细胞自噬

也是细胞的一种生存策略[4].在植物中，细胞自噬与植物度过营养危机和叶子的衰

老有关[4].最近的研究发现，细胞自噬可以清除氧胁迫下细胞内被氧化的蛋白[5].

研究表明植物细胞自噬在应答非生物胁迫起着非常关键的作用[6-9].例如一些非生

物胁迫会诱导细胞自噬的发生，从而调控相应生理生化机制来抵抗相关胁迫[9].有

研究表明活性氧(ROS)可能参与介导诱导细胞自噬应答非生物胁迫[5,8].但也有研

究表明ROS可能没有参与介导诱导细胞自噬应答非生物胁迫[6].盐胁迫是限制粮

食产量和物种分布的一个十分重要的因子.它可以影响植物一系列的生理过程，从

种子萌发到植物发育[10-16].另外，盐胁迫主要影响植物的光合作用，以及光合反

应途径上的代谢过程[14-16].在盐胁迫条件下，降低叶绿体基质容量、诱导产生

ROS，都被认为是抑制光合作用的关键因素.因此本研究拟开展探讨细胞自噬调控

ROS的积累来应答盐胁迫的机制.

2.1材料

野生型拟南芥(Col-0)和细胞自噬突变体atg2和atg5种子购置拟南芥生物资源

中心(ArabidopsisBiologicalResourceCenter).

2.2方法

2.2.1生长条件种子播种在营养土中，浇灌适当的水分，然后放于温室中培养.其

中温室中的培养条件为：温度25℃，光照时间16h，黑暗时间8h，光照强度100

μmol·m-2·s-1.待培养3～4w出现4～5片真叶后，选择长势大体一致的幼苗备用.

2.2.2盐胁迫处理对上述三种拟南芥Col、atg2和atg5进行盐胁迫处理.将拟南

芥幼苗放入160mM的NaCl溶液中，分别处理3d和5d.

2.2.3活性氧染色通过NBT和DAB染色分别对超氧离子和过氧化氢进行检测.具

体可参考Zhu等人[17]的方法.

2.2.4电导率的测定电导率表示水的导电性即水的电阻的倒数，通常用它来表示水

的