p57(kip2)在大肠癌中的表达及其意义 .pdfVIP

p57（kip2）在大肠癌中的表达及其意义

张雅峰;仝林虎;张瑞明;苏秀兰

【摘要】目的：探讨细胞周期调控抑制因子p57kip2在大肠癌的发生、发展及转

移中的作用。方法：运用免疫组织化学S-P法和原位杂交技术,检测p57kip2在

基因和蛋白水平上在60例大肠癌组织、23例正常肠组织中的表达。结果：

1.p57kip2蛋白在大肠癌组织中的阳性表达显著低于正常肠组织（t=14.711,P

〈0.01）,并与大肠癌组织的分化程度、淋巴转移（P〈0.01）有关;在浸润深度中

无统计学意义（P〉0.05）;2.p57kip2mRNA在大肠癌组织中的阳性表达显著低

于正常肠组织（t=10.395,P〈0.01）,并与癌组织的分化程度、淋巴转移（P〈0.01）

有关。结论：p57kip2的低表达可能在大肠癌的发生、发展及转移中发挥重要作

用。

【期刊名称】《内蒙古医科大学学报》

【年(卷),期】2015(037)002

【总页数】4页(P140-143)

【关键词】大肠癌;p57kip2;免疫组织化学;原位杂交技术

【作者】张雅峰;仝林虎;张瑞明;苏秀兰

【作者单位】

【正文语种】中文

【中图分类】R735.9

引言

大肠癌是临床常见的恶性肿瘤,其发病逐年增加。其发生发展与抑癌基因的失活,癌

基因的激活,DNA损伤修复、基因的突变或丢失以及蛋白的过度表达及失表达密切

相关。细胞周期调控是当前肿瘤学研究的热点,近年研究提示细胞周期G1期调控

是细胞内外多因子参与的复杂过程,且细胞周期G1期调控异常与肿瘤发生发展密

切相关。p57kip2作为一种广谱细胞周期蛋白依赖性激酶(Cyclin-dependent

Kimases,CDKs)的抑制剂,对细胞周期起调控作用,主要通过抑制CDK复合物及

PCNA来实现其作用[1]。因此,了解大肠癌的发生、发展规律对于诊治、判断预后

具有重要作用。

1.1一般资料

标本随机取自于2011-07～2013-03间内蒙古医科大学附属医院普外科及内蒙古

医院外科收治的术前未经放疗、化疗,全部病灶行手术切除的大肠癌60例,其中男

性31例,年龄37～76岁女性29例,年龄38～79岁,高分化大肠癌21例,中分化

22例,低分化17例,侵及浆膜34例,未及浆膜26例,21例有淋巴结转移,正常大肠

组织23例。所有病例均经病理学检查确诊。标本离立体后立即取材,并用4%多聚

甲醛固定,常规石蜡包埋;切片厚度6um。整个过程尽量避免外源性RNase降解靶

组织的RNA。

1.2检测方法

免疫组化SP法,p57kip2鼠抗人多克隆抗体,S-P广谱试剂盒均购自福建迈新生物

工程有限公司;原位杂交技术,p57kip2原位杂交试剂盒购自武汉博士德生物制品公

司。操作按说明书进行。PBS代替第一抗体(探针)作阴性对照,DAB染色。

1.3结果判定

1.3.1免疫组化SP法p57kip2是胞核着色,阳性染色呈棕黄色颗粒样物。随机选取

3个视野(×100),利用图像分析系统对p57kip2蛋白表达进行分析,用平均灰度值来

表示。

1.3.2原位杂交技术p57kip2mRNA是胞浆着色,阳性染色呈棕黄色颗粒样物。随

机选取3个视野(×100),利用图像分析系统对p57kip2mRNA表达进行分析,用平

均灰度值来表示。

1.4统计方法

采用SPSS11.0统计软件进行t检验,显著性水平P0.01。

2.1p57kip2蛋白的表达

p57kip2蛋白定位于细胞核中,呈粗大的棕黄色颗粒样物。大肠癌组织中p57kip2

蛋白阳性表达的平均灰度值显著高于正常大肠组织(t=14.711,P0.01)见(图1、2),

中低分化的大肠癌组织显著高于高分化者(t=5.245,P0.01),未侵及浆膜组和侵及

浆膜组中无统计学意义(t=0.01,P0.05),伴淋巴结转移组显著高于无淋巴结转移组

(t=13.174,P0.01)(见表1)。

2.2p57kip2mRNA的表达

p57kip2mRNA定位于细胞浆中,呈粗大的棕黄色颗粒样物。大肠癌组织中

p57kip2mRNA阳性表达的平均灰度值显著高于正常大肠组织(t=10.395,P0.05)

见(图3、4),中低分化的大肠癌组织显