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KRAS基因突变与结直肠癌的研究进展

结直肠癌作为高发的恶性肿瘤，国际医学界一直致力于结直肠癌的治疗研

究。恶性肿瘤靶向治疗药物的问世，结直肠癌也开始应用靶向药物进行治疗，临

床治疗显示，KRAS基因突变与用于结直肠癌单抗EGFR的临床疗效具有较大的

关联，国际上医学已经开始把KRAS基因突变作为是否采用EGFR单抗的重要

检验指标。因而有效的检测KRAS基因突变，具有较高的医学价值。

标签：结直肠癌；KRAS基因突变；靶向治疗；单抗

结直肠癌（colorectalcancer，CRC）是严重威胁人类生命健康的重大疾病之

一，发病率和病死率均位于恶性肿瘤的第3位，KRAS基因长约35kb，位于12

号染色体，编码K-ras蛋白，参与表皮生长因子受体（epidermalgrowthfactor

receptor，EGFR）信号传导过程，是CRC研究中最受关注的基因突变之一。有

研究显示，KRAS基因突变对CRC患者预后有不同的影响，且不同的位点突变

也与之相关。已有许多研究者针对此问题进行了系统评价，KRAS基因是CRC

研究中最受关注的基因突变之一，能增加CRC患者的死亡风险和疾病进展风险，

可能是影响CRC患者预后的危险因素。

1KRAS基因突变的研究

所有的RAS基因里面，KRAS与人类的患癌率直接相关，KRAS基因在人

体内相当于肿瘤患病的开关，它较大程度地影响着人类的细胞生长[1]。正常情

况下的KRAS基因可以有效地抑制肿瘤细胞的生长，但是KRAS基因一旦出现

突变，就会不断地刺激细胞的生长，扰乱细胞的正常生长，从而引发机体的肿瘤

细胞的繁殖[2-3]。直肠癌患者的KRAS基因与肿瘤发病原理具有较大的相关性，

临床数据表明，结直肠癌患者的KRAS基因突变概率高达30%～40%[4-5]。

KRAS基因突變的出现在结直肠癌的早期，这时患者的原发灶与转移灶的

KRAS基因能够保持较大的一致[6-7]。在临床治疗过程中，KRAS基因不会因治

疗过程而出现突变。但是KRAS基因会出现点的突变，突变的位点主要集中在

二号外显子里的12-13密码子，以及三号外显子的61密码子[8-9]。在直肠癌患

者的临床治疗过程中，KRAS基因突变的检出率高达90%以上，这个结果表明，

KRAS的基因突变检测非常具有医学价值[10]。

2KRAS基因突变的检测

2.1突变的检测

KRAS基因突变成为当代医学生命研究的热点课题之一，突变的检测手段也

得到了不断的发展。对于基因突变的检测，20世纪80年代之前，主要采用了

Southern印迹法，能够有效地检测出基因的重组、缺失、乱码、增多等主要突变

情况。但是Southern印迹法无法较好的用于基因突变的检出，因而在较长一段

时间使用较为费时的DNA序列检测分析法。21世纪研究得到的多聚酶链式反应

技术使得基因突变检测得到了较大的进展，基因突变检测建立在多聚酶链式反应

技术的基础上得到了迅速的发展[11-12]。

临床中还采用的KRMS检测方法，在实际中是通过引物设计和琼脂糖电泳

对突变结果进行判定的，不用借用别的器材，非常灵活方便。但对于特定位点里

的设计方案，不能够对未知的突变进行有效的筛查[13-14]。焦磷酸测序技术通过

四种酶催化，促使同一反过程中的酶级联呈现化学的发光反应，这种分析方法可

以有效地检测出SNP的存在。但在检测过程中，需要对于检测样本进行PCR扩

增、跑胶、切胶进行纯化后才能测序，操作步骤复杂，检测成本较高，检测结果

的准确率也不高，不适用于大样本的多位点检测[15]。此外，研究发现的HRM

检测方法可以实时对荧光进行定量检测，也在多聚酶链式反应技术基础之上，对

饱和染料监控核酸曲线变化进行基因分析的主要方法之一。

HRM需要在实时监测过程中对双链DNA荧光染料与多聚酶链式反应技术

产物相结合来有效的对基因进行突变检测，HRM在检