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T细胞因子4在胃癌细胞增殖凋亡中的作用研究

林明政;沈国栋;沈干;徐佳慧;程民;徐婷娟;胡世莲

【摘要】目的研究T细胞因子4(TCF4)在胃癌细胞中的表达以及对胃癌细胞增殖

及衰老、凋亡中的作用.方法培养人胃癌细胞株MGC803、SGC7901、HSC44-

PE、44As3、MKN45、NCI-N87以及人永生化胃黏膜上皮细胞株GES-1,使用

Westernblot法比较TCF4在各细胞之间的表达差异.选择其中TCF4表达高与低

的细胞株,分别通过稳定转染TCF4表达质粒及dominantnegativeTCF4(dnTCF4)

的方法上调与下调细胞TCF4表达,采用体外细胞增殖实验及实时无标记细胞检测

分析(RTCA)等技术检测TCF4对胃癌细胞增殖与凋亡的影响.建立胃癌细胞裸鼠移

植瘤模型,观察TCF4蛋白对胃癌移植瘤生长的影响.结果TCF4在胃癌细胞中的表

达高于对照GES-1细胞.胃癌细胞株按TCF4的表达量从高到低排列依次为NCI-

N87、44As3、HSC44-PE、MGC803、MKN45、SGC7901.TCF4的表达与胃癌

细胞的增殖能力呈正相关性,而与胃癌细胞的衰老、凋亡呈负相关性.结论TCF4在

胃癌细胞中呈高表达,其能促进胃癌细胞的增殖、抑制胃癌细胞的衰老及凋亡.

【期刊名称】《安徽医科大学学报》

【年(卷),期】2016(051)008

【总页数】5页(P1092-1096)

【关键词】胃癌;TCF4;增殖;凋亡

【作者】林明政;沈国栋;沈干;徐佳慧;程民;徐婷娟;胡世莲

【作者单位】安徽医科大学附属省立医院老年病科,老年医学研究所,合肥230001;

肿瘤免疫与营养治疗安徽省重点实验室,合肥230001;肿瘤免疫与营养治疗安徽省

重点实验室,合肥230001;肿瘤免疫与营养治疗安徽省重点实验室,合肥230001;肿

瘤免疫与营养治疗安徽省重点实验室,合肥230001;肿瘤免疫与营养治疗安徽省重

点实验室,合肥230001;肿瘤免疫与营养治疗安徽省重点实验室,合肥230001

【正文语种】中文

【中图分类】R730.2;R735.2

胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发生率和死亡率分别位居第二位和第三位

［1-2］。Wnt信号通路是调控动物胚胎发育、细胞生长增殖的重要信号通路。既

往研究［3-4］显示，Wnt信号通路的异常激活与肠癌等多种肿瘤的发生密切相关，

但其在胃癌发生、发展中的作用仍不清楚。T细胞因子4（Tcellfactor4，TCF4）

是TCF家族的一员，其基因是TCF7L2（transcriptionfactor7-like2），是

Wnt信号通路中重要的信号分子［5-6］。该研究以TCF4为研究对象，探索其在

胃癌细胞中的表达以及在增殖与衰老、凋亡中的作用。

1.1材料

1.1.1实验细胞人永生化胃黏膜上皮细胞株GES-1、人胃腺癌细胞株MGC803、

SGC7901、MKN45购自中科院上海细胞生物学研究所；人胃腺癌细胞NCI-N87

购自中国医学科学院北京肿瘤细胞研究所；人胃癌细胞株44As3及HSC44-PE由

日本名古屋大学武井佳史教授赠送。

1.1.2质粒及菌株pspax2、pMD2G质粒、DH-5α感受态E.coli由中国科技大学

钟永军博士赠送；表达EF1alpha-dnhTcf4/SV40-PuroR质粒的EdTP菌种购自

美国Addgene公司；TCF4全长序列表达质粒购自美国Origene公司。

1.1.3实验动物裸鼠（BALB/c-nu）购自北京维通利华实验动物技术有限公司，

SPF级，22只，雌性，6～8周龄，饲养于安徽医科大学附属省立医院SPF级动

物房中。

1.1.4主要试剂RPMI1640培养基、胎牛血清（FBS）购自美国HyClone公司；

胰酶消化液、RIPA裂解液、5×蛋白上样缓冲液、细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试

剂盒购自上海碧云天公司；蛋白酶抑制剂、蛋白磷酸酶抑制剂购自瑞士