一种高效诱导干细胞向胰岛β样细胞分化的方法 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN105087468A

(43)申请公布日2015.11.25

(21)申请号CN201510553190.4

(22)申请日2015.09.01

(71)申请人东南大学

地址211189江苏省南京市玄武区四牌楼2号

(72)发明人孙博肖忠党

(74)专利代理机构南京苏高专利商标事务所(普通合伙)

代理人王艳

(51)Int.CI

C12N5/071

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

一种高效诱导干细胞向胰岛β样细

胞分化的方法

(57)摘要

本发明公开了一种高效诱导干细胞

向胰岛β样细胞分化的方法。该方法包

括：首先在诱使细胞团聚的前提下，应用

MET激动剂处理该细胞团，达到高效诱导

干细胞向胰岛β样细胞分化的方法。该方

法有助于提高干细胞向胰岛素分泌性细胞

分化的效率和活力，进而治疗因β细胞受

损，胰岛素分泌绝对量减少而导致的高血

糖症。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

专利权的转移IPC(主分类):C12N

5/071专利号:ZL2015105531904

登记生效日更事项:

专利权人变更前权利人:上海金医

保生物工程有限公司变更后权利专利申请权、专利权

2023-04-28

人:夏亮变更事项:地址变更前权的转移

利人:201500上海市金山区朱泾

镇贸易南路254号214215室变

更后权利人:200081上海市虹口

区四达路220弄6号403室

权利要求说明书

1.一种高效诱导干细胞向胰岛β样细胞分化的方法，其特征在于，该方法包括以下

步骤：步骤a：通过诱使细胞团聚；

步骤b：应用MET激动剂激活处理细胞团，高效诱导干细胞向胰岛β样细胞分化。

2.根据权利要求1所述的一种高效诱导干细胞向胰岛β样细胞分化的方法，其特征

在于，所述干细胞为胚胎干细胞，脂肪间充干细胞，脐带血间充质干细胞或脐带间

充质干细胞中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的一种高效诱导干细胞向胰岛β样细胞分化的方法，其特征

在于，所述步骤a诱使细胞团聚采取的方法，是指在明胶包被的培养板上进行悬浮

培养，从而使细胞团聚。

4.根据权利要求1所述的一种高效诱导干细胞向胰岛β样细胞分化的方法，其特征

在于，所述的MET激动剂是指各种可以激活MET蛋白的分子，包括HGF，活性

肽，化学分子或基因工程蛋白质分子中的一种或几种。

5.根据权利要求1所述的一种高效诱导干细胞向胰岛β样细胞分化的方法，其特征

在于，具体步骤如下：

1）脐带血间充质干细胞培养于2%明胶包被的培养板，在含有20%胎牛血清的

DMEM悬浮培养7天后，细胞球平均直径达100微米时即开始诱导；

2）细胞用PBS清洗两次，使用培养基I培养24小时；

3）24小时后，PBS清洗细胞，并更换为培养基II，继续培养48小时；

4）48小时后，PBS清洗细胞，并更换为培养基III，继续培养48小时；

5）48小时后，PBS清洗细胞，并更换为培养基IV，继续培养24小时；

6）经ELISA