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P27和P53蛋白在乳腺癌组织中的表达分析及临床意义

目的：探讨P27和P53蛋白在乳腺癌组织中的表达水平和临床意义。方法：

选取在我院手术治疗的浸润性导管癌患者，术中留取癌组织和癌旁组织标本，采

用免疫组化实验检测其中P27和P53的表达水平。结果：在50例患者的标本中，

癌旁正常乳腺组织中P27的阳性率为78.0%，而P53的阳性率为4.0%；而在癌

旁组织中，P27的阳性率明显下降，仅为36.0%，而P53的阳性率显著升高，为

52.0%；P27和P53与乳腺癌的淋巴结转移均有相关性，其中P27在有淋巴结转

移的组织中呈低表达，而P53在有淋巴结转移的组织中呈高表达；且P27和ER

有一定的相关性，ER阳性患者的P27呈高表达，差异均由统计学意义。结论：

P27、p53蛋白对乳腺癌发生和发展起重要作用，具有较高的临床参考价值。

标签：P27；P53；乳腺癌；免疫组化

乳腺癌是全球女性高发的恶性肿瘤之一，据调查，2013年美国女性患乳腺

癌者新增人数占美国女性患癌症人数的30%[1]。乳腺癌的发病机制复杂，收到

基因水平和蛋白水平上多种信号的共同调控。P27和P53分别是起着抑癌和促癌

作用的蛋白，参与到包括乳腺癌在内的多种肿瘤的发生、发展中。本研究采用免

疫组合实验来分析P27和P53蛋白在乳腺癌中的表达量，并探讨其临床价值。

1资料与方法

1.1一般资料

選取2014年1月～2015年1月来我院接受手术治疗的乳腺癌患者50例为

研究对象，患者年龄26～60岁，平均年龄40.5±3.5岁。所有患者均行乳腺癌根

治术或改良根治术，行术中快速冰冻病理检查及其他常规病理检查确诊。本研究

所选用的50例患者均为确诊的浸润性导管癌患者，且手术治疗前未接受放化疗

治疗。其中有淋巴结转移患者23例，未转移患者27例；有雌激素受体（ER）

阳性患者30例，阴性20例；有孕激素受体（PR）阳性28例，阴性22例。在

术中留取乳腺癌病灶组织及远离癌灶边缘2cm的癌旁正常乳腺组织。

1.2研究方法

本研究采用免疫组化（SP法）判断癌组织及癌旁正常乳腺组织中P27和P53

的表达量。其中P27和P53抗体均购买自Proteintech中国分公司，二抗S-P试

剂盒及DAB显色试剂盒均购自碧云天生物技术研究所，其他试剂及耗材有本院

病理科技术室提供。本研究所有标本均使用4%单聚甲醛固定，并包埋与石蜡中，

切片厚度为4μm，抗原采用高温高压法修复。本研究中阳性对照采用确诊的阳性

乳腺癌切片，阴性对照用磷酸盐缓冲液代替一抗进行操作。

免疫组化（SP法）具体操作如下：一免疫组化（LP法）操作步骤：1、

切片后脱蜡至水，并高压高温高压修复抗原；2、缓冲液洗3次，每次5min；3、

切片放在HydrogenPeroxideBlock中孵育10-15min，以降低内源性过氧化物酶造

成的非特异性背景染色；4、缓冲液洗3次，每次5min；5、滴加UltraVBlock，

在室温下孵育5-10分钟封闭；但不要超过10min，以免导致特异性染色效果降

低；6.缓冲液洗2次，每次5min；7、滴加一抗工作液37℃孵育2小时；8、

缓冲液洗3次，每次5min；9、滴加PrimaryAntibodyEnhancer（增强子），在

室温下孵育20min；10、缓冲液洗3次，每次5min；11、滴加HRPPolymer（酶

标二抗），在室温下孵育30min；此步骤需要避光；12、缓冲液洗3次，每

次5min；13、1mlDABPlusSubstrate中滴加1-2滴DABPlusChromogen（或

AECPlusChromogen），混匀后滴加到切片上，孵育10min；14、自来水充分冲

洗、复染、脱水、透明、封片。

1.3P27和P53的阳性判断

p27蛋白阳性染色呈黄色、棕黄色颗粒，出现与细胞核中，阳性细胞超过10%

则认为阳性，为超过10%则为阴性结果。P53蛋白阳性着色主要定位于细胞核，

呈黄色-棕黄色颗粒，阳性细胞超过10%则认为阳性，为超过10%则为阴性结果。

1.4统计学分析