小球藻的培养.docVIP

一、小球藻

小球藻就是单细胞植物，种类较多，多数生活在淡水中,少数生活在海洋里。按植物学分类，小球藻属于小球藻纲绿藻目原球藻科生物，其体型小,直径一般为３~5μｍ,在显微镜下，需要放大40０~6０0倍才能瞧到，我们肉眼瞧到得只不过就是含有小球藻得绿色得水。小球藻所含得营养成分很高，其蛋白质含量达到５0％~60%（相当于花生米得2倍、鸡蛋得５倍)，含脂肪10%～30%，还含有多种维生素.小球藻得生物活性物质糖蛋白与多糖体得含量也相当高，这些生物活性物质具有增强人体免疫力、抗癌、降血压、抑制血糖上升、排除体内毒素与迅速恢复机体损伤等功能.因此，小球藻得培养前景广阔。

作为培养原料得小球藻，可以到较清洁得池塘、水坑中采集绿色得水，在显微镜下鉴定，然后再用。也可以向培养它得人索取.

１容器得准备

小规模得培养可用瓶、缸等，大规模得培养可用水泥池。首先，要对所使用得容器进行消毒，一般用10０mg／L得漂白粉水溶液浸泡,再用水冲刷数次.

(100ｍg/L得漂白粉水溶液得配制:①天平称量5g2%漂白粉澄清液；

②定量转移至容量瓶中；

③加水至１Ｌ；

④混匀.

2％漂白粉上清液得配制法:取漂白粉2克,加少量水搅匀，再加水至１00毫升，充分调匀后,待澄清后取上清液使用。)

２培养液得准备

(１)BG11液体培养基配方:

Stoｃk１定容１00mL柠檬酸0、3g柠檬酸铁胺０、3gＥDTＡＮa20、05g

Stｏcｋ2定容100０mLNaＮO33０gＫ２ＨPO4０、78gMgSO4·7Ｈ2O1、5g

Sｔock3定容1００mＬCａCｌ２·２H2O１、9ｇ

Sｔock4定容1０0mLＮa2CO32ｇ

Ｓtock5定容１000mLH3BＯ32、86ｇMnＣl2·4Ｈ2O１、８1ｇZnSO4·7Ｈ2O0、222gNａ2ＭnO4·２H2O０、3９1gＣuSＯ4·5Ｈ2O0、0７9ｇCo（NO3）２·6H2Ｏ0、0４9g

Stoｃk１取用2ｍＬSｔock2取用20mLStock3取用2mLSｔoｃk４取用1mLＳtｏck5取用１mL总定容1００0ｍL

(2)购买

２000元／套,九种原液各２00ml(稀释1000倍),10瓶。培养基各取1mｌ.

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3藻种

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4接种

选取生活力强、生长旺盛得藻种，在天气晴朗得上午接种.一般情况下,作为第１级培养,可按藻液与培养液１∶2得比例进行接种。接种得量大,可使藻种迅速成为培养液中得优势种，利用生物间得拮抗作用，减少了污染机会,缩短了小球藻得培养时间.待扩大培养时，可按藻液与培养液1∶4得比例进行接种。

5管理

5、1搅拌由于小球藻不能游动,只能浮在水中生活，所以必须对培养液进行搅拌，让藻体不断变换位置，使光照、养料与水温均衡，这样有利于藻体得迅速生长与繁殖。常用得搅拌工具有玻璃棒、竹棒，每天搅拌3次,每次1分钟.

5、2光照小球藻得培养要有充分得光照,阴雨天光线不足时，可在培养室内用人工光源进行补充,通常用冷白荧光灯，光照强度为2000～3000Lx;但在光线强烈得夏天,要用遮阳网等进行适当避光。

5、3温度及pH温度保持在2５～30℃，最适宜生长温度为2６℃。pＨ保持在6~8。

5、４污染得防治在小球藻得培养过程中,要经常观察藻液得颜色就是否正常、就是否有沉淀与附壁现象、液面就是否有菌膜等异常情况.造成藻种污染得多数情况就是原生动物及杂藻得生长。如果显微镜下检查有原生动物生活，可用1mg/L得漂白粉灭杀。对付其她杂藻最好得办法就是严格控温与经常检查培养液得ｐH。

6采收

当小球藻得培养液变成绿色、用显微镜观察1mL。培养液中大约有１０0个小球藻时，就可以采收或扩大再培养了.采收时,用0、3％~0、５％得明矾粉溶解在培养液里,约1小时后，小球藻沉在了水底，除去上层得水，就能获得小球藻得浓缩液.

二、硅藻

1、储存液：

(１)金属液（每升含）

EＤＴＡ二钠－4、3６0g

氯化铁晶体-3、15０g

五水硫酸铜—0、０1０g

七水硫酸锌-0、0２2g

六水氯化钴-0、010g

四水氯化锰—0、1８０g

二水钼酸钠-0、０06g

（2）维生素液(每升含)

VB12-0、0005ｇ

维生素Ｂ5盐酸盐-０、１g