牛磺酸熊脱氧胆酸对过氧化氢诱导大鼠白内障的影响 .pdfVIP

牛磺酸熊脱氧胆酸对过氧化氢诱导大鼠白内障的影响

王昆

【摘要】从世界范围来说,白内障(Cataract)是可致盲性眼病中最常见的一种[1],牛

磺酸熊脱氧胆酸具有免疫调节,抗氧化和抗凋亡等多种药理作用.本实验观察

TUDCA作用于离体氧化损伤晶状体后的变化,探讨TUDCA对过氧化氢诱导大鼠白

内障的影响.

【期刊名称】《黑龙江医药科学》

【年(卷),期】2011(034)006

【总页数】2页(P103-104)

【关键词】TUDCA;LECs;凋亡

【作者】王昆

【作者单位】佳木斯大学,黑龙江佳木斯154007

【正文语种】中文

【中图分类】R285;R776.1

从世界范围来说,白内障(Cataract)是可致盲性眼病中最常见的一种[1]。牛磺酸熊

脱氧胆酸具有免疫调节,抗氧化和抗凋亡等多种药理作用。本实验观察TUDCA作

用于离体氧化损伤晶状体后的变化,探讨TUDCA对过氧化氢诱导大鼠白内障的影

响。

1材料与方法

1.1试剂和仪器

牛磺酸熊脱氧胆酸,TUNEL试剂盒,眼科显微器械,解剖显微镜,光学显微镜

1.2方法

颈椎脱臼法处死大鼠后取眼球,75%酒精冲洗数秒后,用含32万u/L庆大霉素的

PBS溶夜和含80万u/L青霉素、100万u/L链霉素的PBS溶液各冲洗10min。

在手术显微镜下由后极部剪开巩膜,取出晶状体,放入含5万u/L青霉素和5万u/L

链霉素的培养基中,在37℃的5%CO2培养箱中培养24h,每12小时更换一次培养

液,弃去混浊晶状体,留取透明晶状体以供实验用。以上操作均在无菌条件下进行。

采用随机数字表法将上述透明晶状体随机分为以下5组,每组10个。A组即空白

对照组(将筛选后的透明晶状体置于含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液2mL

的24孔培养板内,每孔l个晶状体,置入37℃,5%CO2培养箱内培养,每6小时更

换1次培养液,培养24h)。B组为H2O2处理组(在A组的基础上再加入3%

H2O24.5μL,使其终浓度为2mmol/mL)。C组为TUDCA1实验组(在B组的基

础上加入浓度为1.0mmol/L的TUDCA)。D组为TUDCA2实验组(在B组的基

础上加入浓度为2.0mmol/L的TUDCA)。E组为TUDCA3实验组(在B组的基础

上加入浓度为3.0mmol/L的TUDCA)。培养24h后,制作组织病理切片,用

TUNEL法检测晶状体上皮细胞凋亡情况。

1.3统计学处理

实验数据以均数±标准差±s)表示,用SPSS17.0统计软件进行统计分析,对计量资

料进行方差分析,P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

在400倍光镜下观察每个TUNEL染色标本,每个标本都计数5个视野的全部细胞

及凋亡细胞数,计算凋亡细胞所占百分比即为晶状体上皮细胞凋亡率。凋亡细胞的

细胞核被染成棕色或褐色,而正常细胞的细胞核被染成蓝色。对照组晶状体上皮细

胞排列紧密,染色均匀,绝大多数细胞核呈蓝紫色,无明显的凋亡细胞。H2O2组晶状

体上皮细胞大小欠均匀,绝大多数细胞核呈棕黄色着染,核固缩,染色质聚集成团,可见

大量凋亡细胞。TUDCA各组晶状体上皮细胞轻度缩小变形,可见部分细胞核呈棕

黄色着染,但比H2O2组减少。经方差分析,各实验组之间两两比较均有显著性差异

(P＜0.05)。测得实验各组的凋亡率见表1。

表1培养24h各组晶状体上皮细胞凋亡率(±s,n=10)组别晶状体上皮细胞凋亡率

(%)对照组5.11±0.97H2O2组88.64±4.24TUDCA1组69.73±2.96T

UDCA2组36.52±2.41TUDCA3组48.31±3.82

图1各组大鼠晶状体上皮细胞凋亡情况(TUNEL×400)a空白对照图bH2O2组c

TUDCA1组dTUDC